[发明专利]一种外周血游离DNA靶向富集的方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201511027421.4 | 申请日： | 2015-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN105441426B | 公开（公告）日： | 2018-07-03 |
| 发明（设计）人： | 任绪义;张峰;俞岳峰;吕江峰 | 申请（专利权）人： | 杭州迪安医学检验中心有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 肖明芳 |
| 地址： | 310030 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种外周血游离DNA靶向富集的方法，属于分子检测技术领域。该方法主要根据外周血游离DNA中不同来源的DNA片段大小的差异选择性去除大片段DNA从而达到靶向富集小片段DNA的目的。通过本发明所得到的靶向富集后的外周血游离DNA可广泛应用于下游诸多分子诊断，如基于检测母体血浆中胎儿游离DNA的无创性产前分子诊断(NITP)等。 | ||
| 搜索关键词： | 游离DNA 外周血 靶向 富集 分子诊断 分子检测技术 选择性去除 大片段DNA 小片段DNA 母体血浆 试剂盒 无创性 胎儿 检测 应用 | ||
【主权项】：
1.一种外周血游离DNA靶向富集的方法，其特征在于，包括如下步骤:(1)根据目标DNA设计杂交引物，所述的杂交引物用于靶向捕获大片段DNA，所述的杂交引物包括上游杂交引物对和下游杂交引物对，所述的上游杂交引物对和下游杂交引物对分别分布在靶基因扩增片段外侧两端，所述上游杂交引物对和下游杂交引物对的5’端均标记生物素；(2)提取外周血游离DNA；(3)将步骤(1)设计的杂交引物与步骤(2)提取的外周血游离DNA混合，加入杂交试剂，使杂交引物与目标DNA结合，得到混合物；(4)将亲和素标记的磁珠与步骤(3)得到的混合物混合均匀，离心，弃沉淀，上清即为靶向富集后的外周血游离DNA；所述大片段DNA为碱基数大于1kb的DNA。
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