[发明专利]一种元胡止痛滴丸中多指标成分含量的HPLC测定方法

摘要

本发明公开了一种元胡止痛滴丸中多指标成分含量的HPLC测定方法，该方法采用高效液相色谱（HPLC）法，以混合对照溶液为对照，并以延胡索乙素为参照，同时测定了元胡止痛滴丸中7个主要成分原阿片碱、黄藤素、去氢延胡索甲素、延胡索乙素、延胡索甲素、欧前胡素和异欧前胡素。该方法一测多评，利用成分间的相对校正因子实现多成分的测定，对中药多成分的质量进行控制，实现了元胡止痛滴丸的多指标质量评价。该方法操作简便、快捷，大幅度降低了检测成本和时间，提高了工作效率和方法的实用性，能够更有效、更全面、更准确地控制中药成品的质量，确保产品质量的稳定均一，从而达到保证产品服用安全有效的目的。

主权项

一种元胡止痛滴丸中多指标成分含量的HPLC测定方法，其特征在于该方法包括以下步骤：（1）色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；检测波长：254‑300nm；流动相：A相为乙腈，B相为体积浓度为0.1‑1.0%的冰醋酸溶液，调冰醋酸溶液pH值为5.0，采用梯度洗脱，乙腈占流动相体积比为：0‑10min，20%‑22%；10‑30min，22%‑30%；30‑60min，30%‑80%；60‑65min，80%‑100%；流速：0.5‑1.0mL/min；柱温：20‑40℃；（2）混合对照品溶液的制备：取原阿片碱、黄藤素、去氢延胡索甲素、延胡索乙素、延胡索甲素、欧前胡素和异欧前胡素对照品适量，精密称定，加甲醇溶液制成每mL含原阿片碱20μg、黄藤素10μg、去氢延胡索甲素80μg、延胡索乙素40μg、延胡索甲素40μg、欧前胡素20μg、异欧前胡素10μg的混合溶液，摇匀，即得；（3）供试品溶液的制备：取元胡止痛滴丸并研细，取元胡止痛滴丸细粉1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入甲醇溶液50ml，称定重量；超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇溶液补足减失的重量后摇匀、过滤；精密量取续滤液25ml，蒸至近干，残渣用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，并用甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，即得；（4）待测成分相对校正因子测定 ：以混合对照品溶液中延胡索乙素为参照，按照相对校正因子计算公式f_s/k＝（A_s ×C_k）/（A_k ×C_s）分别计算出原阿片碱、黄藤素、去氢延胡索甲素、延胡索甲素、欧前胡素和异欧前胡素6个成分对延胡索乙素的相对校正因子；式中A_s为混合对照品溶液中延胡索乙素的色谱峰面积，C_s为混合对照品溶液中延胡索乙素的质量浓度；A_k为混合对照品溶液中某单一待测成分的色谱峰面积，C_k为混合对照品溶液中某单一待测成分的质量浓度；（5）元胡止痛滴丸中7种成分的HPLC测定：分别精密吸取混合对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定并确定各待测成分的色谱峰，以混合对照品溶液中延胡索乙素的峰面积为对照，按照公式C_kx = f_s/k × C_s ×A_kx/ A_s分别计算供试品溶液中原阿片碱、黄藤素、去氢延胡索甲素、延胡索乙素、延胡索甲素、欧前胡素和异欧前胡素的含量；式中A_kx为供试品溶液中某待测成分的色谱峰面积，C_kx为供试品溶液中某待测成分的质量浓度，A_s为混合对照品溶液中延胡索乙素的色谱峰面积，C_s为混合对照品溶液中延胡索乙素的质量浓度，f_s/k为待测成分对延胡索乙素的相对校正因子。