[发明专利]一种从蛹虫草培养液中提取纯化虫草素的方法

摘要

本发明提供一种从蛹虫草培养液中提取纯化虫草素的方法，步骤为：取蛹虫草培养液为原料，离心或过滤，上清液旋蒸浓缩；将浓缩液上大孔树脂柱，依次使用水、乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩；置于低温结晶。本发明从液体培养基，通过大孔树脂提取，采用水、乙醇溶剂洗脱，整个过程中无严重污染物，也无废液处理问题；通过本发明的三步提取方法，相比现有技术中工艺复杂的提取方式生产成本低、工艺简单，易于批量生产。本发明生成的虫草素白色针状或结晶状，纯度较高能达到95%以上，相比于现有技术大部分只能达到90%有显著的提高。

主权项

1.一种从蛹虫草培养液中分离纯化虫草素的方法，其特征在于：包括以下步骤:（1）获得500ml蛹虫草培养液，将培养液离心过滤，7500rpm离心10min，收集上清液，旋蒸浓缩至10ml；（2）使用培养液浓缩液上大孔树脂柱HP‑20，柱体积100ml，洗脱溶剂依次是水、15%乙醇、95%乙醇，流速3ml/min，洗脱溶剂体积为水300ml，收集10管，30ml/管； 15%乙醇450ml，收集15管，30ml/管；95%乙醇400ml，收集在一起，对接收的洗脱液HPLC检测，收集15%乙醇洗脱液，旋蒸浓缩至10ml；（3）将（2）的浓缩液置于4℃冰箱过夜，获得虫草素结晶，将上清液吸出，置换成纯水，4℃冰箱过夜重结晶，获得55mg针状虫草素结晶，核磁验证为虫草素。