[发明专利]一种金黄色葡萄球菌膜泡展示系统及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201510945536.5 | 申请日： | 2015-12-16 |
| 公开（公告）号： | CN105754916B | 公开（公告）日： | 2019-06-07 |
| 发明（设计）人： | 饶贤才;袁吉振;杨杰;胡珍;杨裔;胡启文;尚伟龙;朱军民 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三军医大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/74;A61K39/12;A61P31/14;G01N33/68;G01N33/569;C12R1/445 |
| 代理公司： | 重庆志合专利事务所(普通合伙) 50210 | 代理人： | 胡荣珲 |
| 地址： | 400038 重*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种金黄色葡萄球菌膜泡展示系统，所述展示系统将任选靶蛋白的编码核苷酸序列插入到锚定蛋白的编码基因的终止子前，表达的融合蛋白将所述靶蛋白展示于金黄色葡萄球菌的膜泡表面；其中，所述靶蛋白为病原体来源的抗原分子或多肽；所述锚定蛋白选自金黄色葡萄球菌谷氨酰胺合成酶、金黄色葡萄球菌烯醇化酶、金黄色葡萄球菌丙酮酸脱氢酶β亚单位、金黄色葡萄球菌ABC转运胞外结合亚单位、金黄色葡萄球菌30S核糖体蛋白S3、金黄色葡萄球菌50S核糖体蛋白L5中的一个或多个。本发明的展示系统不含病毒来源的核酸，大大提高了膜泡使用的安全性。而且，金黄色葡萄球菌不含内毒素成分，简化了重组膜泡的纯化工艺，提高了制备效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 金黄色 葡萄球菌 展示 系统 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种金黄色葡萄球菌膜泡展示系统，其特征在于，所述展示系统将任选靶蛋白的编码核苷酸序列插入到锚定蛋白的编码基因的终止子前，表达的融合蛋白将所述靶蛋白展示于金黄色葡萄球菌的膜泡表面；所述靶蛋白为2型登革病毒外膜E蛋白的III区（EDIII）序列和/或3型登革病毒外膜E蛋白的III区（EDIII）序列；所述2型登革病毒外膜E蛋白的III区（EDIII）序列的编码核苷酸序列为SEQ ID NO:2；所述3型登革病毒外膜E蛋白的III区（EDIII）序列的编码核苷酸序列为SEQ ID NO:3；所述锚定蛋白选自金黄色葡萄球菌烯醇化酶（enolase）和金黄色葡萄球菌丙酮酸脱氢酶β亚单位（Pyruvate dehydrogenase E1 component beta subunit）；所述金黄色葡萄球菌烯醇化酶的编码基因为SEQ ID NO:5所示的eno基因；所述金黄色葡萄球菌丙酮酸脱氢酶β亚单位的编码基因为SEQ ID NO:4所示的pdhB基因；所述展示系统用于表达所述融合蛋白的菌株为金黄色葡萄球菌RN4220；所述锚定蛋白的羧基端连接有标签序列，所述标签序列为Flag标签序列；编码所述标签序列的核苷酸序列为SEQ ID NO:1。
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