[发明专利]利用cDNA-AFLP体系挖掘荻耐盐基因的方法在审
| 申请号： | 201510928068.0 | 申请日： | 2015-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN105567674A | 公开（公告）日： | 2016-05-11 |
| 发明（设计）人： | 宗俊勤;刘建秀;陈静波;李丹丹;张兵;李建建;郭海林;汪毅 | 申请（专利权）人： | 江苏省中国科学院植物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210014 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明属于分子生物学领域，涉及一种适用于能源作物——荻耐盐基因挖掘的cDNA-AFLP体系构建方法。技术方案包括不同耐盐荻资源根系、叶片总RNA的提取；双链cDNA的合成及纯化；双链cDNA的限制性酶切及接头连接；连接产物的预扩增及选择性扩增；电泳后银染并分析扩增产物多态性及不同耐性材料的差异条带；差异条带的回收、克隆、测序分析。本发明通过建立的荻cDNA-AFLP体系，不需要预先知道任何序列信息，且多态性强，假阳性低，速度快，解决了目前荻无该体系的问题，拓宽了其分子标记辅助育种的思路和领域，扩展了基因挖掘的方式。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 cdna aflp 体系 挖掘 荻耐盐 基因 方法 | ||
【主权项】：
适用于能源作物——荻耐盐基因挖掘的cDNA‑AFLP体系构建方法，其特征在于取不同耐盐荻资源根系、叶片，以提取的总RNA为模板合成cDNA双链并纯化，利用EcoRⅠ及MseⅠ限制性内切酶对获得的双链cDNA进行限制性酶切并连接接头，然后进行预扩增和选择性扩增，利用变性聚丙烯酰胺凝胶对反应产物进行电泳、银染后分析扩增产物多态性及不同耐性材料的差异条带，并通过对差异条带的回收、克隆、测序分析，挖掘能源作物——荻的耐盐基因。
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