[发明专利]一种姜黄组织培养快速繁殖方法

摘要

一种姜黄组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：取姜黄地下块茎作为外植体，清洗、消毒、再清洗，并吸去块茎表面水，将外植体置于MS发芽培养基中诱导发芽，得到无菌试管苗；将所述试管苗置于MS丛芽培养基中繁殖培养，获得丛生芽；将所述丛生芽置于MS壮苗培养基中培养，获得健壮植株；将所述健壮植株移到1/2MS生根培养基中生根培养，得到完整带根苗；将完整带根苗炼苗6-10d后，先移植于沙床生长27-33d，再移栽到大田。采用本发明所述的培养方法得到丛生芽的增殖系数为10～15倍，获得组培苗生根率100％，移栽苗床成活率95％以上，有效解决了姜黄工厂化育苗的问题。

主权项

一种姜黄组织培养快速繁殖方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)外植体的选择与消毒：取姜黄地下块茎作外为植体，先用2v/v％的洗洁精水溶液浸泡20min，线状自来水冲洗15‑20min，再用添加了2‑3滴吐温‑20的0.1m/v％的升汞消毒10‑15min，无菌水冲洗3‑5次，最后用消毒滤纸吸去除外植体表面水分，其中，无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水；(2)块茎发芽培养和获得无菌试管苗：将步骤(1)中获得的外植体接种到MS发芽培养基中培养得到无菌试管苗，其中MS发芽培养基中添加IAA 0.1‑0.5mg/L、6‑BA 0.5‑2.0mg/L、蔗糖30mg/L、琼脂5mg/L，pH值5.8；(3)试管苗快速繁殖和获得丛生芽：将步骤(2)中得到的试管苗接种至MS丛芽培养基中培养25‑30d，获得丛生芽，其中，MS丛芽培养基中添加ZT 0.1‑1.0mg/L、IBA 0.1‑1.0mg/L、蔗糖30mg/L、琼脂5mg/L，pH值5.8；(4)丛生芽壮苗培养：将步骤(3)中得到的丛生芽转接至MS壮苗培养基中培养25‑35d，得到健壮植株，其中MS壮苗培养基中添加6‑BA 0.5‑1.5mg/L、NAA 0.1‑0.5mg/L、蔗糖30mg/L、琼脂5mg/L，pH值5.8；(5)生根培养：将步骤(4)中得到的健壮植株转接至1/2MS生根培养基中培养25‑35d，得到带根完整植株，其中1/2MS培养基中添加NAA 0.1‑1.0mg/L、IBA 0.1‑0.5mg/L、蔗糖15mg/L、琼脂5mg/L，pH值5.8；(6)炼苗与移栽：室温下打开组培瓶盖，加入少量自来水，炼苗7天；待培养基表面形成角质后，取出幼苗，洗净根部培养基，移栽到沙床中；在沙床中生长27‑33d，移栽到大田。