[发明专利]一种利用RNA干扰技术提高里氏木霉生产纤维素酶的方法在审

专利信息
申请号: 201510900044.4 申请日: 2015-12-08
公开(公告)号: CN105602919A 公开(公告)日: 2016-05-25
发明(设计)人: 姚斌;苏小运;王榕;薛鲜丽;罗会颖;黄火清;王亚茹;柏映国;石鹏君;王苑 申请(专利权)人: 中国农业科学院饲料研究所
主分类号: C12N9/42 分类号: C12N9/42;C12N15/80
代理公司: 北京法思腾知识产权代理有限公司 11318 代理人: 高宇
地址: 100081 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明涉及基因工程领域,具体涉及利用RNA干扰技术提高里氏木霉产纤维素酶酶活的方法。所述方法包括依次包括串联的cbh1启动子、反向的cre1基因片段、正向的cre1基因片段以及cbh2终止子的RNA干扰质粒的步骤。本发明通过对里氏木霉的cre1基因进行RNA干扰,获得了纤维素酶酶活显著提高的转化子。转化子在MM-Avicel中培养4.5天后,其中酶活最高的一株转化子,其纤维素酶的滤纸酶活0.51U/mL,较出发菌株分别提高了1.2倍。CMC酶活2.78U/mL,较出发菌株提高了1.4倍。MUC酶活0.65U/mL,较出发菌株提高了7.9倍。
搜索关键词: 一种 利用 rna 干扰 技术 提高 里氏 生产 纤维素酶 方法
【主权项】:
一种快速提高里氏木霉生产纤维素酶的方法,其特征在于,所述方法包括依次包括串联的cbh1启动子、反向的cre1基因片段、正向的cre1基因片段以及cbh2终止子的RNA干扰质粒的步骤,其中,所述cbh1启动子的序列如SEQ ID No.1所示,所述反向的cre1基因的序列如SEQ ID No.2所示,所述正向的cre1基因的序列如SEQ ID No.3所示,所述cbh2终止子的序列如SEQ ID No.4所示。
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