[发明专利]一种畜禽粪便高效腐熟剂及其发酵方法

摘要

本发明提供了一种用于快速无臭无害化的畜禽粪便高效腐熟剂及其发酵方法，包括如下质量比的微生物菌种组分和载体组分：所述微生物菌种组分为枯草芽孢杆菌10％～15％，地衣芽孢杆菌10％～15％，酵母菌5％～15％，黑曲霉3％～8％，黑曲霉3％～8％，产乳酸嗜酸乳杆菌10％～20％，产乳酸植物乳杆菌10％～20％，和载体组分为麦芽糊精10％～20％。其主要由各种饲料级的芽孢菌及其它微生物菌与载体麦芽糊精组成，其可以在3‑7天时间内，首先快速将畜禽粪便先腐熟发酵成为无臭物质，然后再累计发酵成为安全无害化的产物，消灭其中的致病菌，寄生虫，杂草种子等并可作为有机肥料及其对植物发芽指数的影响。

主权项

1.一种畜禽粪便高效腐熟剂，其特征在于，包含如下重量份数的组分：活菌数1000亿cfu/g的枯草芽孢杆菌15份，活菌数1000亿cfu/g以上的地衣芽孢杆菌15份，活菌数200亿cfu/g以上的酿酒酵母10份，活菌数50亿cfu/g以上的黑曲霉5份，活菌数50亿cfu/g以上的米曲霉5份，活菌数1000亿cfu/g以上的产乳酸嗜酸乳杆菌15份，活菌数1000亿cfu/g以上的产乳酸植物乳杆菌15份和麦芽糊精20份，枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌培养工艺如下：各自典型营养琼脂斜面试管菌种，培养4天，选取菌落特点突出的菌种，然后进行如下步骤：(1)接实验室一级种子培养3L ：培养基：酵母浸粉6g，牛肉膏15g，蛋白胨30g，葡萄糖30g，七水硫酸镁1.5g，磷酸氢二钾1.5g，氯化钠15g，加入3L水，充分溶解后，用氢氧化钠调pH值至7.0，分装至三角烧瓶，于125℃灭菌20min；接种：灭好菌的培养基冷却后，用接种环接种；培养条件：摇床温度控制在36±1℃，转速190转/min，培养18‑20小时；(2)车间二级种子罐培养 300L：培养基：酵母粉1.5kg，玉米浆干粉6kg，葡萄糖6kg，氯化钠1.5kg，磷酸二氢钾150g， 磷酸氢二钾600g；用氢氧化钠调pH值至7.0；培养基灭菌控制0.1mPa、120℃ 20～30分钟；接种：火焰接种，接种量300～500ml；培养条件：控制罐温36±1℃、罐压0.06±0.01mPa，通气量100～150L/分钟，接种后开搅拌，搅拌转速80～120转/分钟，培养16～20小时；培养标准：镜检菌体染色着色深、菌体生长均匀、无杂菌，芽孢尚未形成；(3)车间三级发酵罐培养3000L：培养基：黄豆粉28kg，葡萄糖60kg，淀粉20kg，玉米浆干粉60kg，酵母粉15kg，蛋白胨28kg，硫酸锰1.1kg，硫酸镁1kg，氯化钠15kg，磷酸二氢钾1.5kg，用氢氧化钠调pH7.0，培养基灭菌控制0.1mPa、120℃ 20～30分钟；移种：接种量150～200L；培养条件：控制罐温36±1℃、罐压0.06±0.01mPa，通气量700‑750L/min，移种后开搅拌，搅拌转速100‑150转/分钟，培养18‑24小时；发酵中间控制：8小时后，每2小时取样测pH及OD值；发酵终点控制：当稀释10倍OD值连续1.5以上，并且呈下降趋势，pH值持续上升，取样进行镜检，镜检菌体染色着色不深、菌体生长均匀、无杂菌，几乎全部形成芽孢，可以终止发酵；(4)离心机离心将最终的发酵液打入到离心机进行离心，得到固液混合物；(5)喷雾干燥混合离心充分后，经过喷雾干燥大型设备进行高温喷雾，固体产品即为高活性、高含量的枯草芽孢杆菌或者地衣芽孢杆菌；其中产乳酸嗜酸乳杆菌、产乳酸植物乳杆菌培养工艺如下：各自MRS典型斜面试管菌种，培养4天，选取菌落特点突出的菌种，然后进行如下步骤：(1)实验室一级种子培养2.5L培养基：酵母浸粉30g，牛肉膏30g，蛋白胨30g，葡萄糖60g，硫酸镁1.5g，磷酸氢二钾6g，乙酸钠15g，柠檬酸铵6g；加入2.5L水，充分溶解后，用氢氧化钠调pH值至7.0，分装至三角烧瓶，于125℃灭菌20min；接种：灭好菌的培养基冷却后，用接种环接种；培养条件：生化培养箱温度控制在36±1℃，静置培养36‑48小时；(2)车间二级种子罐培养 250L培养基：硫酸铵150g，硝酸钠150g，磷酸氢二钾600g，硫酸镁150g，玉米浆干粉2.4kg，蛋白胨3kg，葡萄糖6kg，氯化钠150g，柠檬酸铵600g；pH值7.0，消后体积控制在250‑300L；培养基灭菌控制在0.1mPa、120℃ 20～30分钟；接种：火焰接种，接种量2‑2.5L；培养条件：控制罐温36±1℃、罐压0.06±0.01mpa，不通风，不开搅拌，静置培养24～48小时；培养标准：镜检菌体染色着色深、菌体生长均匀、无杂菌；(3)车间三级发酵罐培养 2500L培养基：硫酸铵1.5kg，硝酸钠1.5kg，磷酸氢二钾6kg，硫酸镁1.5kg，玉米浆干粉24kg，蛋白胨30kg，葡萄糖60kg，氯化钠1.5kg；pH值7.0，消后体积控制在2500L；培养基灭菌控制在0.1mPa、120℃ 20～30分钟；移种：接种量300～320L；培养条件：控制罐温36±1℃、罐压0.06±0.01mpa，不通风，不开搅拌，静置培养24～48小时；发酵中间控制：16小时后，每2小时取样测pH及OD值；发酵终点控制：当稀释10倍OD值连续0.3以上，并且呈下降趋势，pH值3.5以下，并且呈上升趋势，取样进行镜检，镜检菌体染色着色不深、菌体生长均匀、无杂菌，可以终止发酵；(4)离心机离心将最终的发酵液打入到管式离心机进行离心，得到固液混合物；(5)冷冻干燥混合离心充分后，经过冷冻干燥设备进行低温冷冻干燥，固体产品即为嗜酸乳杆菌或者植物乳杆菌。