[发明专利]一种鸡GM-CSF蛋白及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种鸡GM-CSF蛋白的制备方法，包括如下步骤：a.合成优化的编码鸡GM-CSF蛋白的核苷酸序列，该核苷酸序列如序列SEQ ID No:1所示；b.利用SEQ ID No:1所示序列构建表达载体，所述表达载体为：pFastBac1-hi s-thrombin-GM-CSF；c.将b步骤得到的表达载体进行病毒包装，得到病毒原种；d.将病毒原种进行扩增培养，然后感染对数期的sf9细胞，培养感染后的sf9细胞24-72h，收集培养基中的上清，经离心、层析处理，即得。本发明还提供该方法制得的鸡GM-CSF蛋白以及该蛋白的应用。本发明的制备方法，蛋白表达水平高、易于放大、利于大规模生产。

主权项

一种鸡GM‑CSF蛋白的制备方法，其特征在于包括如下步骤：a.合成优化的编码鸡GM‑CSF蛋白的核苷酸序列，所述优化的编码鸡GM‑CSF蛋白的核苷酸序列如序列SEQ ID No:1所示；b.利用SEQ ID No:1所示序列构建表达载体，所述表达载体为：pFastBa c1‑his‑thrombin‑GM‑CSF；c.将经过b步骤得到的表达载体进行病毒包装，得到病毒原种；d.将经过c步骤得到的病毒原种进行扩增培养，然后收集扩增后的培养基上清液并用收集到的上清液感染对数期的sf9细胞，然后在培养基中培养感染后的sf9细胞24‑72h，收集培养基中的上清，经离心、层析处理，得到鸡GM‑CSF蛋白。