[发明专利]乳酸根插层的类水滑石超薄纳米片负载生物活性分子导入植物细胞的方法有效

专利信息
申请号: 201510834328.8 申请日: 2015-11-25
公开(公告)号: CN105441484B 公开(公告)日: 2019-06-18
发明(设计)人: 万迎朗;包文龙;王强;王君雅 申请(专利权)人: 北京林业大学
主分类号: C12N15/87 分类号: C12N15/87
代理公司: 北京国坤专利代理事务所(普通合伙) 11491 代理人: 郭伟红
地址: 100083 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种乳酸根插层的类水滑石超薄纳米片负载生物活性分子导入植物细胞的方法,合成乳酸根插层的类水滑石纳米材料,在水中剥离获得二维纳米片;对LDH‑lactate‑NS进行XRD等表征分析鉴定;用含有不同浓度LDH‑lactate‑NS的培养基处理模式植物材料BY‑2细胞和拟南芥,获得LDH‑lactate‑NS负载生物活性分子导入植物细胞的安全浓度;将生物活性分子和LDH‑lactate‑NS以不同的质量比进行偶联,获得最优吸附比的纳米片‑生物活性分子复合物;将最优吸附比的纳米片‑生物活性分子复合物与植物细胞共孵育,以最优孵育时间将生物活性分子导入完整的活体植物细胞中。
搜索关键词: 乳酸 根插 滑石 超薄 纳米 负载 生物 活性 分子 导入 植物 细胞 方法
【主权项】:
1.一种乳酸根插层的类水滑石超薄纳米片负载生物活性分子导入植物细胞的方法,其特征在于,按照以下步骤进行:步骤1,合成乳酸根插层的类水滑石纳米材料MgAl‑lactate LDH,在水中剥离获得二维纳米片LDH‑lactate‑NS;步骤2,将剥离的LDH‑lactate‑NS滴在铜网上进行透射电子显微镜成像,并烘干LDH‑lactate‑NS进行扫描电子显微镜成像,采用凝胶法将LDH‑lactate‑NS置于托盘获得XRD特征谱,并用激光照射LDH‑lactate‑NS胶体检测丁达尔现象;步骤3,用含有不同浓度LDH‑lactate‑NS的缓冲液处理BY‑2细胞和拟南芥,获得其负载生物活性分子导入植物细胞的安全浓度;步骤4,将生物活性分子和LDH‑lactate‑NS以不同的质量比进行偶联;步骤5,将二维纳米片‑生物活性分子复合物与植物细胞共孵育,把生物活性分子导入植物细胞中;所述步骤4中,LDH‑lactate‑NS:带负电荷的生物活性分子DNA质量比为3:1时,LDH‑lactate‑NS:带负电荷的生物活性分子FITC质量比为5:1时,可完全吸附;所述步骤5具体按照以下步骤进行:将LDH‑lactate‑NS的浓度控制在100ug/ml以下作为工作浓度,以DNA:LDH‑lactate‑NS质量比1:3以上,以FITC:LDH‑lactate‑NS质量比1:5以上,孵育时间为1h,即将生物活性分子导入植物细胞中。
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