[发明专利]拟穴青蟹抗菌肽SCY2的制备方法与应用在审
申请号: | 201510831229.4 | 申请日: | 2015-11-25 |
公开(公告)号: | CN105274134A | 公开(公告)日: | 2016-01-27 |
发明(设计)人: | 王克坚;刘杰;彭会 | 申请(专利权)人: | 厦门大学 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N15/12;C07K14/435;A61K38/17;A61P31/04;A23K20/147 |
代理公司: | 厦门南强之路专利事务所(普通合伙) 35200 | 代理人: | 马应森 |
地址: | 361005 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 拟穴青蟹抗菌肽SCY2的制备方法与应用,涉及拟穴青蟹。制备方法:拟穴青蟹抗菌肽SCY2表达载体的构建:设计上游引物,设计时在5′端EcoRⅠ酶切位点前加入Kex2酶切位点氨基酸序列所对应的碱基序列,PCR扩增SCY2基因,将SCY2基因插入pPIC9K载体中,即得pPIC9K-SCY2重组表达载体;将所得到的重组表达载体转化入宿主细胞,对宿主细胞进行诱导表达,获得表达产物;分离纯化所得的表达产物,再进行N端测序,确定所获得的表达产物为具有与天然蛋白有相同N端的SCY2。拟穴青蟹抗菌肽SCY2可在制备细菌生长抑制剂中应用,SCY2还可在制备动物饲料添加剂以及抗病原微生物药物中应用。 | ||
搜索关键词: | 拟穴青蟹 抗菌 scy2 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
拟穴青蟹抗菌肽SCY2的制备方法,其特征在于包括以下步骤:1)拟穴青蟹抗菌肽SCY2表达载体的构建:设计上游引物,设计时在5′端EcoR Ⅰ酶切位点前加入Kex2酶切位点氨基酸序列所对应的碱基序列,PCR扩增拟穴青蟹抗菌肽SCY2基因,将所述拟穴青蟹抗菌肽SCY2基因插入pPIC9K载体中,即得pPIC9K‑SCY2重组表达载体;2)将步骤1)所得到的重组表达载体转化入宿主细胞,对宿主细胞进行诱导表达,获得表达产物;3)分离纯化步骤2)所得的表达产物,再进行N端测序,确定所获得的表达产物为具有与天然蛋白有相同N端的拟穴青蟹抗菌肽SCY2。
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