[发明专利]用于肿瘤过继性免疫的高增殖力、高杀伤力NK细胞在审
| 申请号： | 201510809118.3 | 申请日： | 2015-11-20 |
| 公开（公告）号： | CN105219713A | 公开（公告）日： | 2016-01-06 |
| 发明（设计）人： | 崔长友 | 申请（专利权）人： | 崔长友 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 长沙星耀专利事务所 43205 | 代理人： | 许伯严 |
| 地址： | 210046 江苏省南京市栖霞区*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开用于肿瘤过继性免疫的高增殖力、高杀伤力NK细胞，制备方法包括以下步骤：(1)将浓度为0.01～3.0mg/ml的抗人CD3单克隆抗体、0.01～3.0mg/ml的抗人CD16单克隆抗体包被在细胞培养瓶中，包被条件为室温，孵育时间为0.5～6h；(2)将从外周血中分离获得的单个核细胞用无血清培养液接种在上述的细胞培养瓶中，刺激12～24h；(3)加入NK细胞培养用无血清培养液和浓度为20～50ng/ml的IL-2、浓度为20～50ng/ml的IL-15以及浓度为30～80ng/ml的SepulturinA，刺激12～84h，然后转入细胞培养袋中继续培养；(4)收获NK细胞。该方法可以获得高增殖力和高杀伤力的NK细胞，可用于肿瘤的细胞免疫治疗。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 肿瘤 过继 免疫 增殖 杀伤力 nk 细胞 | ||
【主权项】：
一种体外扩增NK细胞的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将浓度为0.01～3.0mg/ml的抗人CD3单克隆抗体、0.01～3.0mg/ml的抗人CD16单克隆抗体包被在细胞培养瓶中，包被条件为室温，孵育时间为0.5～6h；(2)将从外周血中分离获得的单个核细胞用无血清培养液接种在上述的细胞培养瓶中，刺激12～24h；(3)加入NK细胞培养用无血清培养液和浓度为20～50ng/ml的IL‑2、浓度为20～50ng/ml的IL‑15以及浓度为30～80ng/ml的Sepulturin A，刺激12～84h，然后转入细胞培养袋中继续培养；(4)收获NK细胞。
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