[发明专利]基于生物素和链霉亲和素系统的微流控免疫芯片分析方法

摘要

本发明提供一种基于生物素和链霉亲和素系统的微流控免疫芯片分析方法，包括如下步骤：(1)取第一张微流控芯片与基底密封，将包被物质通入通道中包被，去掉第一张芯片；(2)取第二张微流控芯片与基底密封，通入待测物，孵育后用缓冲液进行冲洗；(3)通入以生物素或链霉亲和素标记的二抗，孵育后用缓冲液进行冲洗，所述二抗为抗待测物的抗体；(4)通入链霉亲和素或生物素标记的HRP，孵育后用缓冲液进行冲洗；(5)去掉第二张微流控芯片，向反应区域加入HRP催化发光的化学反应液，以化学发光仪读取数据。本发明的免疫分析方法具有灵敏度高、信号读出方式简单、检测线性范围宽、分析速度快、检测成本低、可以实现高通量检测等优势。

主权项

一种基于生物素和链霉亲和素系统的微流控免疫芯片分析方法，其特征在于，其包括如下步骤：(1)取第一张微流控芯片与基底密封，使通道I的表面与基底紧密贴合，将包被物质通入通道I中以包被在基底上，包被完成后去掉第一张微流控芯片；(2)取第二张微流控芯片与基底密封，使通道II的表面与基底紧密贴合且通道II的排布方向与通道I的方向垂直，向通道II中通入待测物，孵育后用缓冲液进行冲洗；(3)向通道II中通入以生物素或链霉亲和素标记的二抗，孵育后用缓冲液进行冲洗，所述二抗为抗待测物的抗体；(4)向通道II中通入链霉亲和素或生物素标记的HRP，孵育后用缓冲液进行冲洗；(5)去掉第二张微流控芯片，向反应区域加入HRP催化发光的化学反应液，以化学发光仪读取数据；其中，所述通道I为第一张微流控芯片的通道，所述通道II为第二张微流控芯片的通道；当待测物为完全抗原时，所述包被物质为能够与所述完全抗原对应结合且与所述二抗具有不同抗原结合位点的抗体，当待测物为抗体时，所述包被物质为与所述抗体对应的完全抗原或与所述抗体对应的由半抗原分子与蛋白质载体偶联形成的人工抗原；当步骤(3)中加入以生物素标记的二抗时，则步骤(4)中加入以链霉亲和素标记的HRP；当步骤(3)中加入以链霉亲和素标记的二抗时，则步骤(4)中加入以生物素标记的HRP。