[发明专利]一种快速检测全血红细胞脂肪酸的方法

摘要

本发明提供一种快速检测全血红细胞脂肪酸的方法，属于生物检测技术领域，包括如下步骤A）全血样品的前处理；B）对所述样品检测液采用气相色谱‑质谱仪进行检测。本发明提供的检测方法具有样品用量少，前处理简单，灵敏度高，特异性强，定性、定量功能强大，并且整个检测过程时间短、检测通量高等优点。

主权项

一种快速检测全血红细胞脂肪酸的方法，其特征在于：包括如下步骤：A)全血样品的前处理：从全血样品中分离红细胞，加入内标溶液和盐酸‑甲醇溶液进行衍生化反应，90℃避光反应3h，然后加入萃取剂萃取，取上清液并氮气吹干，残渣中加入复溶剂，混匀，得到样品检测液；所述盐酸‑甲醇溶液的浓度为3mol/L；B)对所述样品检测液采用气相色谱‑质谱仪进行检测，气相色谱条件包括：色谱柱采用极性色谱柱，载气为氦气，不分流进样，线速度流量控制方式，载气流量为0.9mL/min，起始柱温60℃，以40℃/min的速率先升温至180℃，然后以10℃/min的速率升温至220℃，保持2.3min，整个升温程序的梯度时间为8～15min；质谱条件为：采用电子轰击离子源，采用全扫描和选择离子扫描方式；所述萃取剂选自正己烷，所述复溶剂选自正己烷；所述红细胞、盐酸‑甲醇溶液、萃取剂及复溶剂的体积比为1：20：40：8；所述气相色谱条件还包括：进样体积为1μL，进样口温度为230℃，后运行温度为240℃，后运行时间为2min，吹扫流量为4.0mL/min，总流量为55.0mL/min；所述质谱条件还包括：电离源为电子轰击离子源(EI)，70ev；传输线温度为230℃，离子源温度为250℃，四极杆质量分析器温度为150℃，溶剂延迟时间为3.70min；全扫描范围为m/z 60.00～450.00；所述极性色谱柱选自规格为20m*0.18mm*0.20μm的DB‑23极性毛细管色谱柱；所述脂肪酸包括十四烷酸、十六烷酸、十六烷一烯酸、十七烷酸、十八烷酸、十八烷一烯酸、十八烷二烯酸、十八烷三烯酸、二十烷酸、二十烷一烯酸、二十烷二烯酸、二十烷三烯酸、二十烷四烯酸、二十二烷酸、二十烷五烯酸、二十二烷四烯酸、二十四烷酸、二十二烷五烯酸、二十二烷六烯酸和二十四烷一烯酸。