[发明专利]一种基于比色分析的免疫传感器的制备方法及应用

摘要

本发明涉及一种基于比色分析的免疫传感器的制备方法及应用，属于新型功能材料，新型传感器构建技术领域。基于抗原抗体之间良好的特异性，以及显色复合物对过氧化氢的快速响应，显著提高了传感器的灵敏度，降低了传感器的检出限，可以实现对肿瘤标志物的实时在线检测，对肿瘤的早期诊断具有重要的意义。

主权项

一种基于比色分析的免疫传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）用质量分数为0.1%~10%的3‑氨丙基三乙氧基硅烷APTES的甲醇溶液浸泡3 mm × 3 mm的ITO玻璃24 h，取出后洗涤；（2）在ITO玻璃上滴加6 µL、3‑氨丙基三甲氧基硅烷‑戊二醛显色复合物APTMS‑GA，4 ºC冰箱中晾干；（3）继续滴加6 µL、1 µg/mL~100 µg/mL的甲胎蛋白抗体Ab，4 ºC冰箱中晾干，超纯水冲洗，再于4 ºC冰箱中晾干；（4）继续滴加6 µL、质量分数为0.1%~2%的BSA溶液，封闭玻璃表面上非特异性活性位点，4 ºC冰箱中晾干；（5）继续滴加6 µL、0.0001 ng/mL~50 ng/mL的一系列不同浓度的甲胎蛋白抗原标准溶液到ITO玻璃上，超纯水冲洗，4 ºC冰箱中晾干；（6）继续滴加6 µL的抗体孵化物Ab@Au@N‑TiO₂@GO_x溶液，4 ºC冰箱中晾干，超纯水洗涤，4 ºC冰箱中晾干；（7）继续滴加6 µL、1~100 mmol/L的葡萄糖溶液，充分反应；（8）将修饰好的ITO依次放入微孔板中， 4 ºC冰箱中晾干，制得比色免疫传感器。