[发明专利]基于多节间茎段一体化培育黄花倒睡莲组培苗方法

摘要

本发明提供一种基于多节间茎段一体化培育黄花倒睡莲组培苗方法，取黄花倒睡莲植株为外植体，经过表面消毒、初代培养、一体化培养、炼苗、移栽，最终获得黄花倒睡莲组培苗。本发明提供了一种采用多节间茎段作为外植体，同时采用专项研究出的独立配方使其在一代的培养基中完成增殖、生根等过程，利用它们一体化的方法来培育出黄花倒睡莲组织培养苗。本方法提高繁殖系数的同时，保存了苗木的优质性来满足引种推广的需求；这种黄花倒睡莲组织培养技术能在较短的30‑50 d内，繁殖出大量具有保持母本优良品质的黄花倒睡莲植株。

主权项

基于多节间茎段一体化培育黄花倒睡莲组培苗方法，其特征在于：取黄花倒睡莲植株为外植体，经过表面消毒、初代培养、一体化培养、炼苗、移栽，最终获得黄花倒睡莲组培苗；所述方法具体包括以下步骤：(1)表面消毒：取生长健壮、无病虫害的野生黄花倒睡莲植株为外植体，去除叶片后用软毛刷轻刷表皮，将其进行表面消毒处理a后，切成含有2‑4个多节间的茎段备用；若选择生长健壮的黄花倒睡莲组培苗用于繁殖，则采用消毒处理b后直接切取后进行初代培养；(2)初代培养‑丛生芽诱导与增殖：将已经过消毒处理的多节间茎段接种入培养基A中，多节间茎段横放平铺于培养基中，10‑15天后进行一体化培养；培养基A配方为：MS+ 6BA 1.5 mg/L + NAA 0.05 mg/L + KT 0.5 mg/L + Suc 30 g/L +琼脂粉8 g/L，PH值为5.8；(3)一体化培养：将经初代诱导的多节间丛生芽切取成1.5‑2.0 cm长的单芽横放入培养基B中，每瓶接种30棵，光照强度为1500‑3000 lx，10天后开始生根，20天长至6‑8 cm高度后，准备移栽；(4)炼苗：20天后，将瓶苗从培养室取出放置常规室内3‑5天，第6天将瓶盖打开后继续放置2天，期间每天要补充10‑15 ml无菌水至瓶内，第8天后将组培苗轻轻夹出，洗净根部培养基，以备移栽；(5)移栽：将洗净的黄花倒睡莲组培苗用500 ppm多菌灵溶液浸泡30 min后，取出，用稀黄土将其根部包裹成鸡蛋大小后，移栽，放入基质为泥炭土、黄泥土、珍珠岩按一定配比组合的栽培基质中种植；(6)田间栽培管理：将幼苗移栽田间，环境温度 24‑26℃，喷雾保湿，保持空气湿度 85‑95%，覆盖遮阴率 70%遮阳网，每周喷洒1 次广谱杀菌剂，每月浇1次两倍 MS 大量溶液，一年后植株的平均根粗达0.5‑0.8 cm；培养基B配方为：1/4 MS+ IBA 0.2 mg/L + NAA 0.5 mg/L + AC 1 g/L + Suc 20 g/L +琼脂粉9 g/L，PH值为5.9。