[发明专利]高速逆流色谱分离纯化十大功劳叶中单体化合物的方法

摘要

本发明公开了一种从十大功劳叶中快速分离纯化单体化合物的方法，包括以下步骤取阴干粉碎的十大功劳叶，加入乙醇溶液超声提取，过滤，滤液减压浓缩得十大功劳叶提取物；提取物经不同极性溶剂萃取后，乙酸乙酯萃取段用高速逆流色谱仪分离，根据色谱图收集相应峰组分，减压浓缩干燥，得到高纯度绿原酸、槲皮素‑3‑O‑β‑D‑葡萄糖苷、异鼠李素‑3‑O‑β‑D‑葡萄糖苷，克服了传统制备方法操作复杂，样品死吸附损失，收率低等缺点。本方法效率高，操作简单，制备量大，综合成本低，具有很好的推广使用价值。

主权项

高速逆流色谱分离纯化十大功劳叶中绿原酸、槲皮素‑3‑O‑β‑D‑葡萄糖苷、异鼠李素‑3‑O‑β‑D‑葡萄糖苷的方法，其特征在于，包括以下工艺步骤：(1) 十大功劳叶提取物的制备：十大功劳叶阴干、粉碎，纯乙醇为溶剂超声提取，固液比为 1 ：20，提取时间 2 h，过滤，滤渣重复处理2次；合并滤液并真空减压浓缩得十大功劳叶粗提物；(2) 将步骤（1）中粗提物用水打散，分别用正己烷，二氯甲烷，乙酸乙酯，正丁醇萃取，萃取液过滤，减压浓缩分别得到正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水萃取段，4°C冰箱保存备用；(3) 单体的分离：采用正己烷‑甲醇‑乙酸乙酯‑水为溶剂体系，上相为固定相，下相为流动相，分离柱转速为700 ‑ 900 rpm，对十大功劳叶乙酸乙酯萃取段进行 HSCCC 分离，紫外检测器在线监测，分别收集不同馏分并减压干燥，得绿原酸、槲皮素‑3‑O‑β‑D‑葡萄糖苷、异鼠李素‑3‑O‑β‑D‑葡萄糖苷。