[发明专利]高速逆流色谱分离纯化十大功劳叶中单体化合物的方法

权利要求书

1.高速逆流色谱分离纯化十大功劳叶中绿原酸、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷的方法，其特征在于，包括以下工艺步骤：

(1) 十大功劳叶提取物的制备：十大功劳叶阴干、粉碎，纯乙醇为溶剂超声提取，固液比为 1 ：20，提取时间 2 h，过滤，滤渣重复处理2次；合并滤液并真空减压浓缩得十大功劳叶粗提物；

(2) 将步骤（1）中粗提物用水打散，分别用正己烷，二氯甲烷，乙酸乙酯，正丁醇萃取，萃取液过滤，减压浓缩分别得到正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水萃取段，4°C冰箱保存备用；

(3) 单体的分离：采用正己烷-甲醇-乙酸乙酯-水为溶剂体系，上相为固定相，下相为流动相，分离柱转速为700 - 900 rpm，对十大功劳叶乙酸乙酯萃取段进行 HSCCC 分离，紫外检测器在线监测，分别收集不同馏分并减压干燥，得绿原酸、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷。

2.根据权利要求1所述的高速逆流色谱分离纯化十大功劳叶中绿原酸、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷的方法，其特征在于，步骤（3）所述的正己烷-甲醇-乙酸乙酯-水的体积比为1:1:1:1- 1:8:1: 8。

3.根据权利要求2所述的高速逆流色谱分离纯化十大功劳叶中绿原酸、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷的方法，其特征在于，步骤（3）所述的正己烷-甲醇-乙酸乙酯-水的体积比为1:5:1:5。

4.根据权利要求1-3任一项所述的高速逆流色谱分离纯化十大功劳叶中绿原酸、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷的方法，其特征在于，步骤（3）所述的流动相流速为2 mL/min。