[发明专利]采用人小涎腺上皮干/祖细胞制备肝细胞的方法及应用在审
申请号: | 201510313877.0 | 申请日: | 2015-06-10 |
公开(公告)号: | CN105219698A | 公开(公告)日: | 2016-01-06 |
发明(设计)人: | 赵振民;张辰;张翔宇;吕璘;韩婷璐;童海州;刘磊;杜水果 | 申请(专利权)人: | 赵振民 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N5/074 |
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地址: | 100144 北京市石景山区八大*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了属于组织工程产品制备技术领域的一种采用人小涎腺上皮干/祖细胞制备肝细胞样细胞及胆管细胞样细胞的方法及应用。本发明的方法从人小涎腺组织体外分离培养出上皮干/祖细胞,并在上皮细胞培养基中进一步培养扩增,之后在含生长因子的成肝诱导培养基中,通过平面培养或三维培养体系,诱导分化获得肝细胞样细胞和胆管细胞样细胞。本发明的优点是取材来源广,易于切取,创伤微小,口内供区隐蔽,制备的肝细胞样细胞和胆管细胞样细胞可用于肝细胞的生理功能或病理变化的研究、肝脏疾病的细胞模型的建立、体外药物试验、体外毒性试验、体外生物工程化的类肝器官的构建、体内肝细胞移植治疗肝病。 | ||
搜索关键词: | 用人 小涎腺 上皮 细胞 制备 肝细胞 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种采用人小涎腺上皮干/祖细胞制备肝细胞样细胞和胆管细胞样细胞的方法,其特征在于,按照如下步骤进行:(1)制备人小涎腺上皮干/祖细胞:a)预处理人小涎腺组织;b)在角质细胞培养基中贴壁培养预处理后的人小涎腺组织,培养分离出小涎腺上皮干/祖细胞;小涎腺上皮于/祖细胞在上皮细胞培养基中进一培养扩增;(2)人小涎腺上皮干/祖细胞诱导分化为肝细胞样细胞和胆管细胞样细胞,接种人小涎腺上皮干/祖细胞于平面培养体系或3D培养体系中,添加含有生长因子的上皮干/祖细胞成肝诱导培养基,经过21天诱导培养后获得肝细胞样细胞和胆管细胞样细胞。
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