[发明专利]耐高温异淀粉酶基因的克隆、表达及应用

摘要

本发明属于基因工程和生物能源技术领域，具体涉及一种耐高温异淀粉酶基因克隆、表达及在酶生物燃料电池中的应用。该淀粉酶DNA序列如SEQ ID NO.1所示，全长2151bp。该耐高温异淀粉酶氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，包括716个氨基酸，分子量为83.1KDa，其中编码序列17~108氨基酸为第48家族的碳水化合物结合模序；编码序列204~545氨基酸为淀粉酶催化结构域。该耐高温异淀粉酶可用于酶生物燃料电池。本发明优势在于：异淀粉酶耐高温、酶活力稳定，具有很强工业应用潜力；用于糖燃料电池时，可使淀粉类物质彻底水解为葡萄糖，从而提高能量转化效率，拓展生物燃料电池的应用范围。

主权项

1.一种耐高温异淀粉酶在酶生物燃料电池中的应用，其特征在于，所述耐高温异淀粉酶氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述酶生物燃料电池为单极室无隔膜类型，结构包括：反应容器、离子交换膜和反应物；所述反应物包括：淀粉、耐高温异淀粉酶、α‑葡聚糖磷酸化酶、磷酸葡萄糖变位酶、6‑磷酸葡萄糖脱氢酶、二氢硫辛酸脱氢酶、HEPES缓冲液、NaCl、NAD+、 Mg2+、Mn2+和电子穿梭体；所述耐高温异淀粉酶的最适反应条件为，500μL 反应体系中，40 mM pH 5. 5 的乙酸缓冲液，0.5 mM MgCl2，85℃催化反应。