[发明专利]一种具有核壳结构的胍基固定化亲和磁球的制备及应用

摘要

本发明涉及一种具有核壳结构的胍基固定化亲和磁球的制备及应用，采用超顺磁性四氧化三铁微球为基质，表面键合3‑(三甲氧基甲硅基)甲基丙烯酸酯形成乙烯基修饰的磁球，利用蒸馏沉淀聚合反应得到具有核‑壳结构的聚合物包覆磁球；通过对聚合物层进行功能化修饰得到胍基固定化的核‑壳结构的聚合物包覆磁球。在本发明的制备材料中，利用胍基与磷酸根问强烈的相互作用，可以分别实现对α‑酪蛋白(α‑casein)或β‑酪蛋白(α‑casein)酶解液中多磷酸肽或者全磷酸肽的选择性富集，对磷酸肽富集容量达到200mg/g，对磷酸肽检测限达到0.5fmol，对磷酸肽富集回收率达到91.30％。利用材料的超顺磁性，可在30s内实现快速完全的分离。

主权项

一种具有核壳结构的胍基固定化亲和磁球的制备方法，其特征在于，具体步骤为：第一、乙烯基修饰的磁球的制备将250 mg ~ 350 mg直径为50 nm ~ 500 nm超顺磁性四氧化三铁微球均匀分散在比例为4:1 ~ 6:1之间的水和乙醇的混合溶剂中，加入1 mL ~2 mL浓氨水，逐滴加入0.6 mL ~ 1.0 mL的3 ‑（三甲氧基甲硅基）甲基丙烯酸酯，温度稳定在50℃~ 70℃之间，机械搅拌1 天 ~ 1.5天，得到乙烯基修饰的磁球；第二、核‑壳结构的聚合物包覆磁球的制备称取40 mg ~ 80 mg的步骤一中制备的乙烯基修饰的磁球，将其均匀分散在30 mL ~ 50 mL的乙腈溶液中，加入100 μL ~ 180 μL的甲基丙烯酸缩水甘油酯和120 mg ~ 180 mg N，N‑亚甲基双丙烯酰胺及3 mg ~ 7 mg偶氮二异丁腈，温度稳定在95 ℃ ~ 105 ℃之间，维持1 h ~ 2 h，得到以四氧化三铁微球为内核，聚合物层为外壳，具有核‑壳结构的聚合物包覆磁球；第三、氨基键合的聚合物包覆磁球的制备将步骤二中制备的核‑壳结构的聚合物包覆磁球分散在60 mL~100 mL的无水乙二胺溶液中，温度稳定在70 ℃ ~ 90 ℃之间，维持2 h ~ 4 h，得到氨基键合的聚合物包覆磁球；第四、将步骤三中制备的氨基键合的聚合物包覆磁球加入体积为20 mL~ 40 mL含有5 mmol/L ~15 mmol/L的磷酸盐缓冲溶液中，用1 mol/L氢氧化钠或1 mol/L盐酸将溶液pH值调整为6.5 ~ 8.5，加入 80 mg ~ 120 mg S‑乙基异硫脲氢溴酸盐，通入氮气保护，温度稳定在65 ℃ ~ 75 ℃之间，维持2 h ~ 4 h，得到具有核壳结构的胍基固定化亲和磁球。