[发明专利]一种合金纳米粒子修饰的电致发光细胞传感纸芯片的制备

摘要

本发明公开了一种基于合金纳米粒子修饰的电化学发光细胞传感纸芯片的制备方法。该传感纸芯片的制作方法包括以下步骤制备Au@Pd修饰的纸芯片工作电极；制备多孔PtNi合金纳米材料；制备高性能量子点碳点（CDs）与PtNi@CDs发光标记复合物；利用电极修饰技术，将适配体和细胞以及发光标记复合物修饰到传感纸芯片的Au@Pd工作电极表面。一种基于多金属纳米粒子修饰的电化学发光细胞传感纸芯片的检测方法包括如下步骤将修饰好的传感纸芯片连接到电化学工作站，配合化学发光仪，对待测液进行检测。本发明的电极特异性强；灵敏度高；完成一个检测过程时间短；成本低。电极检测肿瘤细胞的方法，操作简单快速，反应及结果均由仪器自动完成和记录。

主权项

一种合金纳米粒子修饰的细胞传感纸芯片的制备方法，其特征在于该方法的具体步骤为：（1.1）在计算机上设计微流控纸芯片的疏水区域的打印图案，将纸裁剪成打印机适合的尺寸，然后置于喷墨打印机中，打印已经设计好的疏水区图案；（1.2）将带有蜡图案的的A4纸放到平板加热器或烘箱中，在60‑150摄氏度下加热0.5‑2分钟, 使蜡融化并浸透整个纸的厚度，形成疏水区域；然后进行丝网印刷，分别将参比电极、工作电极和对电极分别印刷到相对应的区域；（1.3）制备Au@Pd纳米材料，将制备的Au@Pd纳米材料修饰工作电极；（1.4）制备PtNi合金纳米材料，将制备的PtNi合金纳米材料冰水浴超声处理10‑30 min, 得到分散性较好的合金材料溶液；（1.5）制备碳点溶液，将制备的碳点溶液离心处理5‑10min，除去不发光的沉淀物质，得到分散性较好的碳点溶液；（1.6）将（1.4）制备的PtNi合金材料溶液与（1.5）制备的碳点溶液混合超声，处理20‑30min， 然后离心分离去除沉淀，得到分散性较好的PtNi@CDs 复合材料溶液；（1.7）将（1.6）制备好的PtNi@CDs 复合材料溶液与伴刀豆球蛋白A进行振荡处理20‑30min, 然后离心除去未反应的部分，得到Con A‑PtNi@CDs复合物；（1.8）将（1.3）制备好的电极表面通过层层修饰与自组装的技术逐层修饰上适配体与一定浓度的肿瘤细胞，经过逐步清洗除去未反应的适配体与细胞；（1.9）将（1.6）制备的溶液修饰到（1.8）已修饰的电极表面，反应20‑30min后经过清洗除去未反应的标记复合物，配合电化学工作站和化学发光分析仪对肿瘤细胞进行检测。