[发明专利]一种合金纳米粒子修饰的电致发光细胞传感纸芯片的制备

权利要求书

1.一种合金纳米粒子修饰的细胞传感纸芯片的制备方法，其特征在于该方法的具体步骤为：

（1.1）在计算机上设计微流控纸芯片的疏水区域的打印图案，将纸裁剪成打印机适合的尺寸，然后置于喷墨打印机中，打印已经设计好的疏水区图案；

（1.2）将带有蜡图案的的A4纸放到平板加热器或烘箱中，在60-150摄氏度下加热0.5-2分钟, 使蜡融化并浸透整个纸的厚度，形成疏水区域；然后进行丝网印刷，分别将参比电极、工作电极和对电极分别印刷到相对应的区域；

（1.3）制备Au@Pd纳米材料，将制备的Au@Pd纳米材料修饰工作电极；

（1.4）制备PtNi合金纳米材料，将制备的PtNi合金纳米材料冰水浴超声处理10-30 min, 得到分散性较好的合金材料溶液；

（1.5）制备碳点溶液，将制备的碳点溶液离心处理5-10min，除去不发光的沉淀物质，得到分散性较好的碳点溶液；

（1.6）将（1.4）制备的PtNi合金材料溶液与（1.5）制备的碳点溶液混合超声，处理20-30min， 然后离心分离去除沉淀，得到分散性较好的PtNi@CDs 复合材料溶液；

（1.7）将（1.6）制备好的PtNi@CDs 复合材料溶液与伴刀豆球蛋白A进行振荡处理20-30min, 然后离心除去未反应的部分，得到Con A-PtNi@CDs复合物；

（1.8）将（1.3）制备好的电极表面通过层层修饰与自组装的技术逐层修饰上适配体与一定浓度的肿瘤细胞，经过逐步清洗除去未反应的适配体与细胞；

（1.9）将（1.6）制备的溶液修饰到（1.8）已修饰的电极表面，反应20-30min后经过清洗除去未反应的标记复合物，配合电化学工作站和化学发光分析仪对肿瘤细胞进行检测。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是：所述的Au@Pd修饰纸电极的制作步骤为：首先将15.0微升Au纳米种子滴加到纸电极的工作区域，然后在室温下反应1h，清洗除去未结合的Au纳米后，将该电极放入到含有HAuCl₄和H₂PdCl₄ 的混合溶液中，所述混合溶液中HAuCl₄的浓度为10 mmol/L，所述混合溶液中H₂PdCl₄的浓度为20 mmol/L，然后在振荡的条件下迅速加入柠檬酸，最后得到的Au@Pd修饰纸电极清洗后置于室温下30 min后即可得。

3.根据权利要求1-2中任一项所述的制备方法，其特征是：所述的PtNi合金纳米材料的制作步骤为：通过在电弧炉里精炼高纯度的Pt、 Ni、Al金属，然后在氮气保护的环境下利用旋铸技术制备得到 PtNiAl 合金；

然后通过去合金化处理将制得的PtNiAl 合金溶解在1 mol/L NaOH溶液里48h即可得到PtNi合金纳米材料。

4.根据权利要求1-2中任一项所述的制备方法，其特征是：所述的化学发光分析仪为西安瑞迈IFFM-E型流动注射化学发光分析仪。