[发明专利]一种高效表达高分子量型腈水合酶的基因工程菌及其应用有效
| 申请号： | 201510244547.0 | 申请日： | 2015-05-13 |
| 公开（公告）号： | CN104830747B | 公开（公告）日： | 2018-01-16 |
| 发明（设计）人： | 周哲敏;张晓欢;崔文璟 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N9/88;C12P13/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙)11419 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种高效表达高分子量型腈水合酶的基因工程菌及其应用，属于微生物基因工程技术领域。本发明所述的高分子量型腈水合酶基因nhhB(rbs)A(rbs)G是基于R.rhodochrous J1来源的腈水合酶基因bag，经密码子优化及表达元件改造之后化学合成得到，该基因全长1645bp，编码533个氨基酸，能够在大肠杆菌中成功表达。该方法高效安全，在24℃诱导16h即可获得96.7U/mL可溶性腈水合酶，纯化后比酶活高达234U/mg。该方法有利于生产过程中腈水合酶的提取纯化以及酰胺类物质的高效酶法合成。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高效 表达 分子量 水合 基因工程 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种高产高分子量型腈水合酶的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌以E.coli BL21(DE3)为宿主，pET24a(+)为载体，表达腈水合酶；所述腈水合酶由氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示的nhhB基因、nhhA基因、调控基因nhhG组成；所述nhhB与nhhA基因、nhhA与nhhG基因均由核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的SD序列和核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示的间隔序列按照“SD序列‑间隔序列”的方式相连；所述腈水合酶的核苷酸序列是SEQ ID NO.6所示的序列；所述腈水合酶的nhhB基因、nhhA基因、调控基因nhhG的序列根据大肠杆菌密码子偏好性进行了优化。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江南大学，未经江南大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201510244547.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
