[发明专利]基于核酸适配体检测链霉素的生物传感器及其制备方法有效
申请号: | 201510135113.7 | 申请日: | 2015-03-26 |
公开(公告)号: | CN104764790B | 公开(公告)日: | 2017-06-09 |
发明(设计)人: | 王玉;崔洁;黄加栋;刘素;徐伟;王虹智;郭玉娜;许颖;邱婷婷 | 申请(专利权)人: | 济南大学 |
主分类号: | G01N27/48 | 分类号: | G01N27/48;G01N27/327;G01N33/543 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所37218 | 代理人: | 张世静 |
地址: | 250022 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明提供基于核酸适配体检测链霉素的生物传感器,包括金电极,金电极上依次修饰有MB capture probe层、HAP与ssDNA层;同时,提供了其制备方法,本发明基于核酸适配体与目标物的特异性识别,该传感器具有检测速度快,检测限低,特异性高等优点,可以弥补链霉素现有检测方法的缺陷与不足,实现对其快速,准确的定量检测。 | ||
搜索关键词: | 基于 核酸 体检 链霉素 生物 传感器 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种基于核酸适配体检测链霉素的生物传感器,其特征在于,在金电极上依次修饰有MB capture probe层、HAP与ssDNA层;所述的生物传感器, MB capture probe层的厚度为10±2nm、HAP与ssDNA层的厚度为15±2nm;其制备包括以下步骤:(1)对金电极进行预处理;(2)将MB capture probe层修饰到电极表面;(3)将HAP 与ssDNA层修饰到电极表面;步骤(3)的具体操作步骤为:1)将灭菌水,10×的buffer缓冲液、1μL的浓度为50μM的 ssDNA、1μL的浓度为10μM HAP和待测目标物加入离心管中,震荡30s,放入37℃的恒温箱中孵育2h;2)向离心管中加入核酸外切酶Exo Ⅲ,震荡30s,放入37℃的恒温箱中孵育2h;3)将孵育好的混合溶液滴加到修饰好MB capture probe层的电极上,将电极继续放在37℃的恒温箱中孵育2h,清洗;其中,HAP 层中HAP与核酸外切酶Exo Ⅲ的摩尔与活性的比为1:250;所述的MB capture probe的核苷酸序列如SEQ ID NO:3 所示;所述的HAP的核苷酸序列如SEQ ID NO:1 所示;所述的ssDNA的核苷酸序列如 SEQ ID NO:2 所示。
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