[发明专利]一套评测杀菌剂对自苹果花器侵染病害防治效果的方法

摘要

本发明公开了一套评测杀菌剂对自苹果花器侵染病害防治效果的方法，涉及植物病害防治药剂评测技术。针对病菌通过花器侵染果实的特点，本发明用苹果和海棠的干制花朵为基质，在干制花朵上接种靶标病菌，进行杀菌剂处理，并对接种病菌和药剂处理的干制花朵进行保湿培养，诱导靶标病菌在干制的花朵产生孢子，最后通过检查病菌是否产孢及产生孢子密度，评测杀菌剂对抑制病菌定殖花器和（或）铲除定殖花器病菌的效果。克服了田间药效试验周期长、费用高、成功率低，室内药剂筛选与实际应用效果差异大等问题，为苹果霉心病、黑点防治药剂的筛选提供一套简便、可靠的方法。

主权项

1.一套评测杀菌剂对自苹果花器侵染病害防治效果的方法，其特征在于：用干制花朵作为培养基质，通过先施药后接种靶标病菌，或先接种靶标病菌后施药的方法，在干制花朵上接种靶标病菌并施用杀菌剂，接种靶标病菌后的花朵经保湿培养，病菌产孢后，检测花朵上靶标病菌的孢子密度，从而评测不同杀菌剂对定殖在花器上病菌的铲除效果和对病菌在花器上定殖的抑制效果及持效期；所述干制花朵为4到5月份苹果盛花期，采集苹果、西府海棠或八棱海棠的盛开的鲜花，在80~90℃的干燥箱中烘干，并放在塑料袋中干燥保存花朵；所述靶标病菌是指通过花器侵染果实的病菌；病菌从病果上分离获得，接种前将靶标病菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）或其他培养基中培养，并诱导病菌产生分生孢子，用纯净水将分生孢子洗下，配制成分生孢子悬浮液，浓度控制在104~106个孢子/毫升，孢子悬浮液现配现用，放置时间不能超过1小时；所述杀菌剂是指待评测的杀菌剂，施药剂前，根据试验设计，用蒸馏水配制成所需要浓度的药液，药液随配随用，放置时间不能超过3小时；所述接种是用手持喷雾器把病菌的分生孢子悬浮液通过喷雾方式均匀地接种到干制花朵或已喷施过杀菌剂的花朵上，直到整个花朵湿润，然后将接种花朵在自然条件下晾置10~20分钟；所述施药是用手持喷雾器把配制好的杀菌剂药液均匀的喷撒到干制花朵或接种病菌的花朵上，直到整朵花完全湿润为止；每种药剂的每个待测浓度处理3~10个花朵；所述保湿培养是将接种病菌的花朵在温度为20℃~30℃，相对湿度不低于90%的恒温环境中培养；所述先施药后接种靶标病菌是指在干制花朵上喷雾施药，自然条件下放置1~2天后，或经过待评测的持效期后，再接种靶标病菌；同一处理的接种花朵分装到3个或5个培养皿中，保湿培养，直到对照花朵上产生孢子后取出；所述先接种靶标病菌后施药是用靶标病菌喷雾接种干制花朵后，保湿培养2~5天；在靶标病菌产生孢子前，将接种花朵取出，喷雾施药；施药后将花朵在自然条件下晾置10~20分钟，每个处理的花朵分装到3个或5个培养皿中，保湿培养，直到对照处理产生孢子后取出；所述检测花朵上接种病菌孢子的密度是将培养花朵取出，检查花朵是否已产生孢子；若已产生孢子，再检测每一个花朵上孢子最密集处，一定面积内孢子的密度；可以对孢子密度进行分级，通过肉眼估测每朵花上孢子密度的级别；也可以在实体显微镜下检查一定面积上孢子、孢子梗或孢子丛的数量；依据单位面积上孢子的密度，计算各种药剂的抑菌或铲除效果。