[发明专利]一种香榧芽体内源激素的检测方法无效
申请号: | 201510092900.8 | 申请日: | 2015-03-02 |
公开(公告)号: | CN104749383A | 公开(公告)日: | 2015-07-01 |
发明(设计)人: | 梅丽;吴家胜;黄坚钦;刘颖坤 | 申请(专利权)人: | 浙江农林大学 |
主分类号: | G01N33/74 | 分类号: | G01N33/74 |
代理公司: | 四川君士达律师事务所 51216 | 代理人: | 芶忠义 |
地址: | 311300 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明提供了一种香榧芽体内源激素的检测方法,将香榧花芽用提取液浸提后过固相萃取柱,浓缩,在96孔酶标板中分别加入标准物、待测样和加有抗体的稀释液,每孔50μl,洗版4次,将加入酶标二抗的稀释液中加入酶标板,每孔加100μl,在湿盒内,37℃下,温育0.5h,洗板,称取邻苯二胺溶于底物缓冲液中溶解,并添加30%H202,在每孔中加100μl,放入湿盒内,显色适当后每孔加入50μl2mol/L硫酸终止反应,测定标准物各浓度和各样品490nm处的OD值,计算结果。本发明方法操作简单,准确度高,回收率高,且方便、快速、安全、成本低廉的特点,在植物激素测定方面具有推广使用价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 香榧 体内 激素 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种香榧芽体内源激素的检测方法,其特征在于:具体包括以下步骤:1)采集香榧花芽置于提取液中4℃过夜浸提,3500转/min离心15min,取上清液;2)上清液过C‑18固相萃取柱,萃取液浓缩,除去甲醇用稀释液定容;3)在96孔酶标板中分别加入标准物、待测样和加有抗体的稀释液,每孔50μl;4)洗版4次,将加入酶标二抗的稀释液中加入酶标板,每孔加100μl,在湿盒内,置37℃下,温育0.5h,洗板;5)称取邻苯二胺溶于底物缓冲液中溶解,并添加30%H202,,在每孔中加100μl,放入湿盒内,显色适当后每孔加入50μl 2mol/L硫酸终止反应;6)在酶联免疫分光光度计上依次测定标准物各浓度和各样品490nm处的OD值。
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