[发明专利]一种鳜传染性脾肾坏死病毒ISKNV的增殖方法有效
| 申请号： | 201510076301.7 | 申请日： | 2015-02-11 |
| 公开（公告）号： | CN104694483B | 公开（公告）日： | 2018-05-04 |
| 发明（设计）人： | 罗霞;付小哲;李宁求;黄志斌;林强 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院珠江水产研究所 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00;C12R1/93 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司44205 | 代理人： | 郑莹 |
| 地址： | 510380 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种鳜传染性脾肾坏死病毒ISKNV的增殖方法。本发明采用同步接毒的方式，病毒与鳜脑组织细胞系CPB成悬浮状态，互相接触的表面积大，使病毒通过更多的空间受体进入细胞；病毒在细胞分裂增殖的同时侵染细胞，从而获得高含量的ISKNV。当CPB培养30h～60h后，转入5%～8%v/v胎牛血清培养基中，同步接种ISKNV的MOI值为0.85～2.3，得到低成本的ISKNV增殖方法。当CPB培养20h～40h后，转入8%～10%v/v胎牛血清培养基中，同步接种ISKNV的MOI值为30～45，得到短时间的ISKNV增殖方法。可根据现有条件选择培养方法，本发明为低成本疫苗的生产提供了理论依据。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 传染性 坏死 病毒 isknv 增殖 方法 | ||
【主权项】：
一种鳜传染性脾肾坏死病毒ISKNV的低成本增殖方法，其特征在于：包括以下步骤：1）将ISKNV敏感的鳜脑组织细胞系CPB传代后培养48h，使用胰酶消化细胞；2）将消化后的CPB细胞转入含有6%v/v胎牛血清的L15培养液中，按照MOI值为0.85～2.3同步接种ISKNV；3）28℃恒温培养接种后的鳜脑组织细胞系CPB 2d～12d，观察CPE达80%以上时收获细胞并提取病毒核酸。
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