[发明专利]一种增强DNA聚合酶Dbh持续合成DNA能力的方法有效
| 申请号： | 201510038532.9 | 申请日： | 2015-01-26 |
| 公开（公告）号： | CN104630205B | 公开（公告）日： | 2018-01-16 |
| 发明（设计）人： | 吴静;王立 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N9/12;C12N15/63 |
| 代理公司： | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙)11419 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种增强DNA聚合酶Dbh持续合成DNA能力的方法，属于酶工程领域。本发明利用柔性linker在Y‑家族聚合酶Dbh的N末端连接Sso7d组合成Sdbh蛋白来增强Dbh对聚合底物的亲和力，提高Dbh持续性合成能力。发明首先对Y家族DNA聚合酶Dbh基因进行克隆并构建Sso7d‑dbh融合蛋白，然后通过E.coli BL21菌株表达Dbh和Sdbh，并对纯化的Dbh和Sdbh进行聚合酶活性、持续合成能力评价及稳态动力学分析一系列的对比实验，最终证实Sso7d能够提高Dbh的持续合成能力。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 增强 dna 聚合 dbh 持续 合成 能力 方法 | ||
【主权项】：
一种增强DNA聚合酶Dbh持续合成DNA能力的方法，其特征在于，利用柔性linker在Dbh的N末端连接蛋白Sso7d；编码所述柔性linker的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，编码所述Sso7d蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；编码所述DNA聚合酶Dbh的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；编码所述N末端连接了Sso7d的DNA聚合酶Dbh的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
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