[发明专利]核苷酸重复障碍中CRISPR-Cas系统的组合物和使用方法

摘要

本发明提供了用于操纵靶序列的序列和/或活性的系统、方法、和组合物的递送、工程化和优化，以便尤其针对核苷酸重复障碍而使用。提供了递送系统和被靶向作为用于递送的部位的组织或器官，以便尤其针对核苷酸重复障碍而使用。还提供了载体和载体系统、以及用于设计和使用此类载体和载体系统的方法，其中这些载体和载体系统中的一些编码尤其针对核苷酸重复障碍而使用的CRISPR复合物或系统的一种或多种组分。还提供了以下方法：在考虑对于靶标识别的特异性和避免毒性的情况下指导在真核细胞中形成CRISPR复合物或系统以便尤其针对核苷酸重复障碍而使用，以及编辑或修饰在感兴趣基因组座位中的靶位点以改变或改善疾病或病症的状态。

主权项

一种用于在具有缺陷型核苷酸元件或三核苷酸重复元件或其他核苷酸重复元件或核苷酸扩增的细胞中使用的非天然存在的或工程化的组合物，该组合物包含：A.I.第一调节元件，该第一调节元件可操作地连接到CRISPR‑Cas系统RNA多核苷酸序列上，其中该多核苷酸序列包含：(a)至少一种第一指导序列，该至少一种第一指导序列能够杂交到该细胞内的靶DNA上，(b)至少一种tracr配对序列，和(c)至少一种tracr序列，并且其中(a)、(b)和(c)以5’到3’方向排列，II.第二调节元件，该第二调节元件可操作地连接至编码CRISPR酶的多核苷酸序列上，其中项A.I和项A.II包含CRISPR‑Cas系统，并且其中所述组合物当转录时包含CRISPR复合物，该CRISPR复合物包含与(1)杂交到或可杂交到该靶序列上的该指导序列、和(2)杂交到该tracr序列上的该tracr配对序列复合的CRISPR酶，其中该指导序列引导CRISPR复合物与该靶DNA的序列特异性结合，并且介导对该缺陷的影响或修复；或，B.I.CRISPR‑Cas系统RNA多核苷酸序列，其中该多核苷酸序列包含：(a)至少一种指导序列，该至少一种指导序列能够杂交到真核细胞中的靶序列上，(b)至少一种tracr配对序列，和(c)至少一种tracr序列，并且其中(a)、(b)和(c)以5’到3’方向排列，II.CRISPR酶，其中项B.I和项B.II包含该CRISPR复合物。