[发明专利]用于检测邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸甲苯基丁酯的单克隆抗体及其应用有效
| 申请号： | 201410829812.7 | 申请日： | 2014-12-26 |
| 公开（公告）号： | CN104558182B | 公开（公告）日： | 2018-08-03 |
| 发明（设计）人： | 袁宗辉;王玉莲;赵兰;彭大鹏;潘源虎;陈冬梅;陶燕飞;刘振利 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C07K16/44 | 分类号： | C07K16/44;C12N5/20;G01N33/577;G01N33/543 |
| 代理公司： | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人： | 徐绍新 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种能识别邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸甲苯基丁酯的特异性单克隆抗体，本发明还公开了一种用于检测邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸甲苯基丁酯的酶联免疫方法及试剂盒。本发明的单克隆抗体是由保藏号为CCTCC NO:C201497的杂交瘤细胞株DBP3B2所分泌的。与现有技术相比，本发明制备的单克隆抗体可以同时识别邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸甲苯基丁酯，对DBP的最低检测限(IC50)仅为44.33μg/L，对BBP的最低检测限仅为62.59μg/L，而且对BBP具有较高的交叉反应率，因此对DBP和BBP这两种邻苯二甲酸酯塑化剂有较高的检测灵敏度和特异性。 | ||
| 搜索关键词： | 邻苯二甲酸二丁酯 邻苯二甲酸 甲苯基 丁酯 单克隆抗体 检测 特异性单克隆抗体 邻苯二甲酸酯 杂交瘤细胞株 检测灵敏度 保藏 交叉反应 酶联免疫 试剂盒 塑化剂 分泌 制备 应用 | ||
【主权项】：
1.一种用于检测饮料中邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸甲苯基丁酯残留的酶联免疫方法，包括以下步骤：(1)以4‑羟基邻苯二甲酸二丁酯为半抗原，与卵血清白蛋白偶联得到包被原；(2)用保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:C201497的杂交瘤细胞株DBP3B2制备单克隆抗体；(3)用步骤(1)的包被原包被固相载体；(4)将待测样品提取后进行酶联免疫检测，所述待测样品的提取方法是：将饮料离心，取上清，取2mL，加入体积比为PBS缓冲液∶乙醇＝8∶2的溶液8mL稀释。
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