[发明专利]一种生物炭固定化微生物共代谢降解三氯乙烯的方法

摘要

本发明一种生物炭固定化微生物共代谢降解三氯乙烯(trichloroethylene，TCE)的方法，属于固定化微生物处理技术领域。生物炭是一种新型材料，呈现紧密层叠的片状结构，表面微孔密集，比表面积较大，吸附性能良好。本发明首次提出以生物炭为载体，利用吸附法固定化荧光假单胞菌，以苯酚为底物共代谢降解土壤中的TCE。比较了两种体系中TCE及苯酚降解的差异，考察了吸附时间、pH、TCE浓度、盐度、加菌量对固定化体系中TCE降解的影响。与游离体系相比，固定化体系对TCE的总体去除率提高了15％，达到55％，且对不良环境的耐受性增强。本发明采用吸附法，以新型材料生物炭为载体，为固定化微生物技术提供了新的方法。

主权项

一种生物炭固定化微生物共代谢降解三氯乙烯的方法，其特征在于，包括以下步骤：第一步：荧光假单胞菌的预培养及菌悬液的制备，该方法选取荧光假单胞菌(Psdeuomnoda fluoerncnet CGMCC1.758)作为TCE共代谢降解菌，购自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；取适量在含苯酚(100mg/L)的无机盐培养液中驯化过的荧光假单胞菌于营养肉汁培养液中进行扩大培养，培养12h后，离心，用无机盐培养液重悬浮，调节菌悬液OD₆₀₀，备用；第二步：生物炭固定化荧光假单胞菌的制备，采用吸附法，将一定量生物炭粉末(每个降解体系中生物炭含量为体系总质量的1％)与菌悬液OD₆₀₀＝0.1～0.5混合，搅拌吸附，吸附时间2～20h，使微生物与生物炭充分结合，备用；第三步：固定化微生物共代谢降解TCE，取10mL生物炭固定化荧光假单胞菌悬浊液，一定体积的共代谢底物标准储备液、TCE储备液于含2g土壤的40mL样品瓶中，pH为7～13，TCE浓度0.2～20mg/L；迅速旋紧瓶盖，摇匀，置于培养箱中，30℃培养若干小时，定点取样测定。