[发明专利]一种毛叶山桐子中抗菌成分的提取方法及用途

摘要

本发明涉及一种毛叶山桐子中抗菌成分的提取方法及提取物的用途。本发明所述的毛叶山桐子中抗菌成分的提取方法具有很高的提取率和优异的分离效果，能够得到多种活性化合物，所提取的活性化合物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌表现出较高的抗菌活性，在抗菌领域具有良好的应用前景。

主权项

一种毛叶山桐子中抗菌成分的提取方法，包括以下步骤：(1)从干燥的毛叶山桐子果实分离出果皮和种子，将种子粉碎后得干粉，以乙酸乙酯为溶剂微波浸提3‑5次，微波功率为700W，每次10‑20分钟，分离提取液，浓缩提取液得乙酸乙酯提取浸膏，分离所得的滤渣再用质量百分比浓度为70％的乙醇提取4次，每次10小时，合并提取液，浓缩至无醇味，得乙醇提取浸膏；取乙醇提取浸膏，经100‑200目硅胶柱，干法上样，硅胶柱先后以二氯甲烷、乙酸乙酯和甲醇进行洗脱，从而将其分为3个部分，分别为二氯甲烷部分、乙酸乙酯部分和甲醇部分；(2)将步骤(1)所得乙酸乙酯提取浸膏经固相柱层析，以环己烷‑丙酮混合溶剂进行梯度洗脱，分别得到化合物β‑香树脂醇和化合物β‑谷甾醇；(3)将上述步骤(1)中乙醇提取浸膏层析柱洗脱后得到的乙酸乙酯部分，过大孔吸附树脂柱，以石油醚‑乙酸乙酯混合溶剂进行梯度洗脱，分别得到化合物二十碳酸和6‑羟基‑2‑[[[(1‑羟基‑6‑氧代‑2‑环己烯基)羰基]氧]甲基]苯基‑β‑D葡糖苷；所述步骤(2)的具体操作如下：将步骤(1)所得乙酸乙酯提取浸膏经固相柱层析，以环己烷‑丙酮混合溶剂进行梯度洗脱，梯度洗脱混合溶剂中环己烷、丙酮的体积比依次为30:1、25:1、20:1、15:1、10:1和5:1；收集两者体积比为30:1、25:1、20:1的洗脱流分，旋蒸除去溶剂，干燥，得到化合物β‑香树脂醇；收集两者体积比为15:1、10:1和5:1的洗脱流分，旋蒸除去溶剂，干燥，得到化合物β‑谷甾醇；所述步骤(3)的具体操作如下：将上述步骤(1)中乙醇提取浸膏层析柱洗脱后得到的乙酸乙酯部分，过大孔吸附树脂柱，以石油醚‑乙酸乙酯混合溶剂进行梯度洗脱，梯度洗脱混合溶剂中石油醚、乙酸乙酯的体积比依次为25:1、20:1、15:1、10:1和5:1，收集25:1和20:1的洗脱流分，旋蒸除去溶剂，干燥得到化合物二十碳酸；收集15:1、10:1和5:1的洗脱流分，旋蒸除去溶剂，干燥得到6‑羟基‑2‑[[[(1‑羟基‑6‑氧代‑2‑环己烯基)羰基]氧]甲基]苯基‑β‑D葡糖苷；所述步骤(3)中的大孔吸附树脂为D101树脂。