[发明专利]D-二聚体质控品的制备方法

摘要

本发明涉及一种检测药剂的制备方法，具体为D-二聚体质控品的制备方法，利用人血浆为原料，与酶复合溶液混合后，温育形成纤维蛋白凝块，用缓冲液洗涤纤维蛋白凝块，用缓冲溶液重悬纤维蛋白凝块，温育后，纤维蛋白凝块溶解，形成D-二聚体母液，用缓冲液调整D-二聚体母液浓度，加入人正常混合血浆，制成不同浓度水平的D-二聚体质控品。该方法工艺简便快捷、成本低。采用人血浆为主要原料，直接制备纤维蛋白，纤维蛋白溶解过程尽可能接近人体内部自然的纤维蛋白溶解过程，从而获得性质结构和人体内部产物尽可能相似的产物，其性质与正常或疾病状态下，人体血液中的D-二聚体状态性质是一致的。

主权项

D‑二聚体质控品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备酶复合液：将氯化钙、凝血酶、纤维蛋白溶解酶激酶加入到缓冲液中，使其浓度依次分别为0.01～0.05mol/L、1～5U/ml、5～20mU/ml，得到的酶复合液在37℃温育10～15分钟；(2)制备纤维蛋白凝块：将多人份混合血浆在37℃温育5～10分钟，与温育的酶复合液混合，颠倒混匀，37℃温育，使其形成纤维蛋白凝块；(3)制备D‑二聚体母液：用缓冲液洗涤纤维蛋白凝块，并挤干纤维蛋白凝块内的血浆，然后用缓冲液将纤维蛋白凝块重悬，在37℃温育0.5～2小时，纤维蛋白凝块溶解，加入丝氨酸蛋白酶抑制剂，以10000g，4℃离心15分钟，收集上清，即得到D‑二聚体母液；(4)制备D‑二聚体质控品：用缓冲液调整D‑二聚体母液浓度，添加到多人份混合血浆中，并加入冻干保护剂，用免疫比浊法测定质控品D‑二聚体浓度，定值、分装、冷冻干燥，即得D‑二聚体质控品。