[发明专利]一种利用角质颚鉴定头足类日龄的方法

摘要

本发明提供一种利用角质颚鉴定头足类日龄的方法，包括角质颚喙部纵截面的研磨以及生长纹计数的方法，主要步骤为提取、清洗、浸泡、剪裁、放置、树脂包埋、切割、固定在载玻片上、打磨、抛光、图片制作和生长纹计数等过程；对角质颚喙部的纵截面进行打磨，即由左右两侧分别向中线研磨至核心面；制作好的切片用CCD拍照，以保证今后随时可以读取生长纹；生长纹由喙部后端向前端沿与生长纹始终保持垂直的方向计数，保证计数的准确性；解决角质颚喙部不易研磨，研磨易碎以及生长纹不易观察和计数的问题。

主权项

1.一种利用角质颚鉴定头足类日龄的方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)裁剪：取出头足类角质颚的上颚，切割上颚分成两半，选取包埋半个角质颚，将角质颚喙部剪下；(2)放置：将步骤(1)中剪下的角质颚喙部放置于模具的凹槽中；(3)树脂包埋：按1:1～1:1.5的体积比将压克力粉和液体固化剂配置成的冷埋树脂溶液，倒入模具中，使溶液覆盖模具，包埋步骤(2)所述的角质颚喙部，放置室温避光处待其硬化；(4)切割：将包埋硬化后的树脂以角质颚喙部切割面为中心，切割成树脂薄片，并使研磨面平行于角质颚喙部切割面；(5)固定：将所述树脂薄片沿平行于角质颚喙部切割面的方向固定在载玻片上；(6)打磨：将固定在载玻片上的树脂薄片打磨，先粗磨至角质颚喙部表面，再细磨至接近角质颚喙部中心处；(7)抛光：将经打磨的树脂薄片抛光研磨面，除去油质和杂质，完成所述树脂薄片一面的研磨；(8)将固定有经抛光的树脂薄片的载玻片在热水中浸泡直至树脂软化，取下树脂薄片，干燥后，将树脂薄片翻面，固定在载玻片上，重复上述的研磨和抛光过程，至角质颚喙部中心面的生长纹清晰可见，得到角质颚喙部切片；(9)生长纹计数：沿生长纹垂直的方向计数喙部背侧和背侧边缘的生长纹的数目，生长纹数目即为头足类的日龄；在所述步骤(9)中的生长纹计数为：(1)图片制作：将制作好切片置于载玻片上，用胶头滴管滴上清水，再盖上盖玻片；在连接有CCD的显微镜100×倍下对角质颚整个喙部的生长纹进行拍照，在400×倍下对角质颚喙部顶端进行拍照；用图像处理软件，对两个倍数下所拍的图片分别进行拼图处理；(2)生长纹计数：先对100×倍下采集的图像由喙部后端向前端，始终沿生长纹垂直的方向计数喙部背侧的生长纹的数目，直至喙部背侧边缘处；然后对边缘处400×倍下采集的图像继续计数生长纹数目。