[发明专利]一种双酶法不对称制备(R)‑2‑氯‑1‑(3‑氯苯基)乙醇的应用有效
| 申请号： | 201410759167.6 | 申请日： | 2014-12-10 |
| 公开（公告）号： | CN104450801B | 公开（公告）日： | 2018-04-13 |
| 发明（设计）人： | 邬敏辰;朱利娟;何瑶;李剑芳;余涛;吴芹 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12P7/22 | 分类号： | C12P7/22;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种共表达羰基还原酶和葡萄糖脱氢酶的大肠杆菌系统在不对称还原制备(R)‑2‑氯‑1‑(3‑氯苯基)乙醇中的应用。以含有羰基还原酶(SyS1)基因和葡萄糖脱氢酶(SyGDH)基因的共表达重组菌E.coil BL21(pETDuet‑Sygdh‑Sys1)为催化剂，并添加一定量的NADP+和葡萄糖，在缓冲溶液/二甲亚砜两相反应体系中实现不对称还原3‑氯苯酰甲基氯高效制备(R)‑2‑氯‑1‑(3‑氯苯基)乙醇。其收率为98％，产物的对映体过量(e.e.)>99％。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 双酶法 不对称 制备 氯苯 乙醇 应用 | ||
【主权项】：
一种不对称转化制备(R)‑2‑氯‑1‑(3‑氯苯基)乙醇的方法，其特征是以羰基还原酶基因(Sys1)和葡萄糖脱氢酶基因(Sygdh)共表达的E.coil BL21菌株为催化剂，并添加一定量的NADP+和葡萄糖，在pH4.5～8.0的缓冲溶液/二甲亚砜两相反应体系中实现不对称还原3‑氯苯甲酰甲基氯高效制备(R)‑2‑氯‑1‑(3‑氯苯基)乙醇；所述3‑氯苯甲酰甲基氯的初始反应浓度为5～90mmol/L，葡萄糖初始反应浓度20～100mmol/L、辅因子NADP+的初始浓度为0.2mmol/L，重组大肠杆菌的用量以湿细胞计为50～100mg/ml，反应温度为20～55℃，反应转速为20～200rpm；反应时间12h。
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