[发明专利]基于中国人群的原代人源乳腺癌移植瘤模型的建立方法及模型

摘要

本发明公开的一种基于中国人群的原代人源乳腺癌移植瘤模型的建立方法，其包括如下步骤：1)人乳腺癌组织标本的获取；2)第一次接种；3)培养第一次接种小鼠；4)第二次接种；5)培养第二次接种小鼠；6)第三次接种；7)培养第三次接种小鼠。本发明公开的一种基于中国人群的原代人源乳腺癌移植瘤模型由上述方法获得。该基于中国人群的原代人源乳腺癌移植瘤模型可作抗乳腺癌药物筛选和药效学研究中的试验动物。本发明克服了在中国人群中现有移植瘤模型所存在的无法真实反映人体内的乳腺癌的生物学特性的问题。并且本发明较之于国外的原代人源乳腺癌相关模型的建立,实现了对原代人源乳腺癌移植瘤生长的长期稳定刺激,改进了模型的建立的方法。

主权项

一种基于中国人群的原代人源乳腺癌移植瘤模型的建立方法，包括如下步骤：1)人乳腺癌组织标本的获取取人乳腺癌组织标本放入预冷装有1640的离心管中并埋入冰中，在20分钟内送入动物房；2)第一次接种将步骤1)获取的人乳腺癌组织标本倒入装有4℃含双抗PBS的培养皿中清洗，然后将人乳腺癌组织标本剪成块状移入套管针内备用；第一次接种小鼠在接种前4到5天前依托泊苷腹腔注射抑制免疫，接种时，将第一次接种小鼠两侧背部剃毛，剃毛部位酒精消毒处理，然后在第一次接种小鼠上肢近端背侧的进针部位剪小口，进针送人乳腺癌组织标本进行接种，接种完毕后，进针部位消毒处理；3)培养第一次接种小鼠喂养第一次接种小鼠形成瘤体体积在300‑500mm³的第一次瘤体小鼠，喂养过程中，喂养含雌激素的饮用水；另外喂养过程中每周至少换笼一次，换笼时，将新的笼盖、笼盒喷洒75％酒精溶液，然后置于超净台内紫外线照射消毒处理；4)第二次接种采用颈椎脱臼法处死步骤3)培养的成瘤小鼠，瘤体部位消毒后游离下肿瘤组织放入装有4℃的PBS培养皿中；然后把肿瘤组织剪成大小约2*2mm小块,留2块3*3mm大小待做石蜡；将肿瘤小块装入套管针备用；第二次接种小鼠在接种前4到5天前依托泊苷腹腔注射抑制免疫，接种时，将第二次接种小鼠两侧背部剃毛，剃毛部位酒精消毒处理，然后在第二次接种小鼠上肢近端背侧的进针部位剪小口，进针送人乳腺癌组织标本进行接种，接种完毕后，进针部位消毒处理；5)培养第二次接种小鼠喂养第二次接种小鼠形成瘤体体积在300‑500mm³的第二次瘤体小鼠，喂养过程中，喂养含雌激素的饮用水；另外喂养过程中每周换笼两次，换笼时，将新的笼盖、笼盒喷洒75％酒精溶液，然后置于超净台内紫外线照射消毒处理；6)第三次接种采用颈椎脱臼法处死步骤5)培养的第二次成瘤小鼠，瘤体部位消毒后游离下肿瘤组织放入装有4℃的PBS培养皿中；然后把肿瘤组织剪成大小约2*2mm小块,留2块3*3mm大小待做石蜡；将肿瘤小块装入套管针备用；第二次接种小鼠在接种前4到5天前依托泊苷腹腔注射抑制免疫，接种时，将第二次接种小鼠两侧背部剃毛，剃毛部位酒精消毒处理，然后在第二次接种小鼠上肢近端背侧的进针部位剪小口，进针送人乳腺癌组织标本进行接种，接种完毕后，进针部位消毒处理；7)培养第三次接种小鼠喂养第三次接种小鼠形成瘤体体积在300‑500mm³的第三次瘤体小鼠建成乳腺癌动物模型，喂养过程中，喂养含雌激素的饮用水；另外喂养过程中每周换笼两次，换笼时，将新的笼盖、笼盒喷洒75％酒精溶液，然后置于超净台内紫外线照射消毒处理。