[发明专利]一种批量制备无菌油棕种胚样品的方法

摘要

本发明公开了一种批量制备无菌油棕种胚样品的方法。用剪枝剪沿成熟油棕果实果柄中心线剪开三分之二，掰开后用解剖针将种胚挑出；将外观健壮饱满的种胚用0.01‑0.05％的氯化汞冲洗后再在超净工作台中用0.01‑0.05％的氯化汞浸泡消毒5‑30min；消毒后的种胚经灭菌水漂洗后用灭菌滤纸除去灭菌水，接种至PhytoTechnology公司的含维生素的MS基本培养基中于20‑30℃条件下暗培养2‑5天，再转移至光培养条件下培养15‑25天即可萌发。本发明在短时间内即可获得大量无菌油棕种胚样品，污染率低，萌发率高，能够满足组织培养以及基于胚培养的转录组、蛋白质组等相关研究对大量样品的需求。

主权项

一种批量制备无菌油棕种胚样品的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)收集成熟的油棕果实，用剪枝剪沿果柄中心线剪开三分之二，掰开即可看到乳白色的种胚，然后用解剖针将种胚挑出，转移至固定在烧杯口的聚酯纤维纱布上；(2)根据肉眼观察比较，用小镊子挑除短小、瘦弱、干瘪与其他种胚有明显差异的种胚，仅保留外观健壮饱满的种胚；(3)用装有0.01％氯化汞的喷壶在纱布上喷雾冲洗可能粘有污染物的种胚，然后用小药勺将干净的种胚转移至超净工作台中的灭菌小烧杯中，用0.05％的氯化汞浸泡消毒5min；(4)将获得的种胚用灭菌蒸馏水漂洗5次除去残留的氯化汞，转移至垫有灭菌滤纸的灭菌培养皿中除去多余的灭菌蒸馏水，然后接种至提前准备好的PhytoTechnology公司含维生素的MS基本培养基中；接种好的培养皿先在25℃条件下暗培养3天，再转移至光培养条件下培养20天；所述光培养的条件为光照强度为1500‑3500LX、温度为30℃。