[发明专利]一种草莓组织培养方法

摘要

本发明公开一种草莓组织培养方法，属于农业生物组织培养技术领域，其包括以下步骤：步骤一、选择外植体：于5~6月份晴天的下午，取健壮、无病草莓植株刚抽出的匍匐茎茎尖，大小为0.3~0.4mm，作为组织培养的外植体茎尖；步骤二、准备培养基：1）分化培养基；2）继代培固体养基；3）诱导生根培固体养基；步骤三、灭菌；步骤四、接种；步骤五、组培苗移栽。本发明的草莓组织培养方法，通过选择升汞作为灭菌剂，杀菌能力较强，并且时间容易控制把握；通过选择不定根直接生自茎基且多而粗壮，3片叶以上且大而深绿的生根苗，使得成活率普遍较高；本方法不仅整体的操作过程较为简单，实施起来较容易，而且能够快速大量繁殖草莓脱毒苗，具备很好的实用性。

主权项

一种草莓组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、选择外植体：于5~6月份晴天的下午，取健壮、无病草莓植株刚抽出的匍匐茎茎尖，大小为0.3~0.4mm，作为组织培养的外植体茎尖；步骤二、准备培养基：1）分化培养基：用于草莓茎尖培养诱导芽分化阶段的基本培养基为MS培养基，附加6‑BA 0.5mg/L，NAA 0.2mg/L，蔗糖30g/L，琼脂粉6.5g/L，并调节培养基pH值为5.8~6.0；2）继代培固体养基：用于草莓茎尖的扩大繁殖阶段的基本培养基采用MS培养基附加6‑BA 0.5mg/L、NAA 0.01mg/L，调节培养基pH值为5.8~6.0；3）诱导生根培固体养基：待幼苗长至2cm以上，即可切下单株转移至生根培养基为1/2MS培养基附加0.2mg/L的NAA，调节培养基pH值为5.8~6.0；步骤三、灭菌：将步骤一中得到的组织培养的外植体茎尖用0.1%升汞水溶液浸泡茎尖8~10分钟，并每隔2分钟摇晃一次，完成灭菌；步骤四、接种：在培养室中，将步骤二中的培养基放置于培养瓶中，将步骤三得到的灭菌后的茎尖，转移至步骤二中得到的分化培养基中；待愈伤组织长出小植株时，切取绿色部分且含有小苗的组织转移至继代培养基中进行扩大繁殖阶段；待幼苗长至2cm以上，即可切下单株转移至诱导生根培养基中；上述的培养条件均为25±2℃,每日光照12小时，光强度2000Lx；步骤五、组培苗移栽：移栽前将培养瓶从培养室中取出置于自然条件下，打开瓶盖进行透气炼苗；24小时后，从瓶中取出幼苗，清除根部及根颈处的培养基，并移栽至苗圃或穴盘中进行驯化。