[发明专利]一种microRNA原位杂交的冰冻切片的制备方法在审

专利信息
申请号: 201410469178.0 申请日: 2014-09-15
公开(公告)号: CN104215471A 公开(公告)日: 2014-12-17
发明(设计)人: 常雪莹;周宇荀;邓倩云;仝莉;肖君华;李凯 申请(专利权)人: 东华大学
主分类号: G01N1/06 分类号: G01N1/06
代理公司: 上海泰能知识产权代理事务所 31233 代理人: 黄志达
地址: 201620 上海市*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明涉及一种microRNA原位杂交的冰冻切片的制备方法,包括:载玻片洁净处理,然后取洁净的载玻片,朝上面标记,滴加200ul浓度为0.1mg/ml多聚赖氨酸工作液;另取载玻片标记面向下,在注有溶液的载玻片上从一端相互反向将溶液推向另一端,直至标记处停止,平放,烘干,干燥后分开,得到防脱玻片;用冰冻切片包埋剂预先浸润组织表面,固定到切片托上,冷冻腔放置,待组织块至表面白色,全部冷冻后放入切片机冷冻夹上进行切片,即得。本发明中玻片易于标准化制作,操作简单,节约试剂,切片制作参数固定,特征明显,易于学习。
搜索关键词: 一种 microrna 原位杂交 冰冻 切片 制备 方法
【主权项】:
一种microRNA原位杂交的冰冻切片的制备方法,包括:(1)将载玻片浸入水中,捞出后加入热的洗衣粉水溶液中,保持较高的洗衣粉水温度0.5h‑1h,然后冲洗,沥干,浸入乙醇中过夜,冲洗,进入重铬酸钾洗液中过夜,冲洗,洗涤,烘干,进行去除RNA酶的高温处理,得到洁净的载玻片;(2)取洁净的载玻片,朝上面标记,滴加多聚赖氨酸工作液;另取载玻片标记面向下,在注有溶液的载玻片上从一端相互反向将溶液推向另一端,直至标记处停止,平放,烘干,干燥后分开,得到防脱玻片;(3)预先用冰冻切片包埋剂浸润组织,固定到切片托上,冷冻腔放置,待组织块至表面白色,全部冷冻后放入切片机冷冻夹上进行切片,即得。
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