[发明专利]一种无细胞多糖真皮基质材料及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种无细胞多糖真皮基质材料及其制备方法和应用。该材料包括无细胞真皮基质材料和多糖，该多糖溶液是羧甲基壳聚糖、硫酸软骨素、透明质酸的复合溶液。无细胞多糖真皮基质材料的制备方法为：选用封装消毒后的PADM，通过称重、复合羧甲基壳聚糖、复合硫酸软骨素、戊二醛交联、复合透明质酸、PBS缓冲液洗、封装、灭菌等。该无细胞多糖真皮基质材料中添加功能型材料可用来制备生物敷料、复合移植支架、组织工程表皮支架。该无细胞多糖真皮基质材料具有良好的体外降解性、高抗张强度、高透水汽性、高孔隙率和优良的抗菌性能。

主权项

1.一种无细胞多糖真皮基质的制备方法，其特征在于：在无细胞真皮基质上复合水溶性多糖，所述水溶性多糖包括羧甲基壳聚糖、硫酸软骨素、透明质酸三种共同组成；具体制备方法步骤为：(1)选用经过消毒封装的猪无细胞真皮基质PADM，并准确称重作为以下各工序的计料依据；(2)复合羧甲基壳聚糖：将制好的PADM放入转鼓中，将与PADM材料质量比为1.5～3.0：1、温度25～45℃、pH值5.5～6.0的羧甲基壳聚糖溶液，分次加入转鼓，反应30分钟后调节pH值到4.5～5.5，再反应60～90分钟，调节pH值到6.5～7.0，处理完毕后放净废液，再将处理后的材料用与其质量比为4.0：1的蒸馏水水洗2次，每次15分钟，洗后控干水；(3)戊二醛交联：在温度25℃，pH值3.0～5.0的条件下向步骤(2)所得材料加入与PADM材料质量比为2.0：1的质量浓度为0.1～0.20％戊二醛溶液，分次加入，逐步调节pH值到8.0，反应30～60分钟，取出材料，用蒸馏水水洗至pH值为7.0～7.3；(4)复合硫酸软骨素：将与PADM材料质量比为1.5～3.0:1、温度25～45℃的硫酸软骨素溶液，分次加入加有步骤(3)产物的转鼓中，反应60分钟后，调节pH值到6.0～7.0，再将处理后的材料用与其质量比为2.0：1的蒸馏水水洗2次，每次15分钟，洗后控干水；(5)复合透明质酸：将透明质酸充分溶解于醋酸溶液中配成透明质酸溶液，将复合了羧甲基壳聚糖、硫酸软骨素后的无细胞真皮基质材料离心脱水，使其体积含水量在70～90％，然后用小喷瓶将透明质酸溶液喷涂到无细胞真皮基质材料表面；(6)PBS液清洗：在温度25℃下用与上述所得材料质量比为3.0：1的PBS溶液冲洗3次，每次30分钟；(7)封装：材料装袋封口；(8)消毒：将封装好的材料用钴‑60 100Gy剂量照射消毒，放入‑4℃无菌环境保存；步骤(2)中，所述羧甲基壳聚糖质量浓度在0.50～1.20％之间；步骤(3)中，所述戊二醛质量浓度在0.1～0.2％之间；步骤(4)中，所述硫酸软骨素质量浓度在0.80～1.00％之间；步骤(5)中，所述透明质酸溶液浓度为1.00％w/v的溶液，透明质酸溶液喷涂量是0.5～1.0g/m2。