[发明专利]一种无细胞多糖真皮基质材料及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种无细胞多糖真皮基质材料及其制备方法和应用。该材料包括无细胞真皮基质材料和多糖，该多糖溶液是羧甲基壳聚糖、硫酸软骨素、透明质酸的复合溶液。无细胞多糖真皮基质材料的制备方法为：选用封装消毒后的PADM，通过称重、复合羧甲基壳聚糖、复合硫酸软骨素、戊二醛交联、复合透明质酸、PBS缓冲液洗、封装、灭菌等。该无细胞多糖真皮基质材料中添加功能型材料可用来制备生物敷料、复合移植支架、组织工程表皮支架。该无细胞多糖真皮基质材料具有良好的体外降解性、高抗张强度、高透水汽性、高孔隙率和优良的抗菌性能。

技术领域

本发明涉及主要涉及生物工程领域，特别是一种无细胞多糖真皮基质材料及其制备和应用。

背景技术

无细胞基质(acellular dermal matrix，ADM)是利用物理、化学、生物等方法将皮肤中的表皮层及含抗原成分的细胞彻底去除仅保留真皮中含胶原网架的细胞外基质而得到的，其具有抵抗原性、良好的生物学性能、良好的力学性能，是理想的生物材料，异种(猪)无细胞真皮基质相对异体无细胞真皮基质具有来源广泛，价廉质优的优点，并且在胶原含量、编制结构上与人体皮肤具有很高的组织同源性并且高度相似，经过改性和交联可以进一步降低其抗原性、提高力学性能、增加材料抗菌性，具有巨大的应用前景。

甲壳素是一种分布极广，易于提取的高分子聚合物，存在于虾、蟹等甲壳动物的甲壳以及细菌、昆虫藻类和高等植物的细胞壁中，壳聚糖是甲壳素脱乙酰度在60％以上的产物是一种线性、半晶体状多糖羧甲基壳聚糖是壳聚糖的衍生物，通过引入羧甲基等小的化学基团，使其在中性和碱性环境中具有良好的水溶性，同时不影响壳聚糖的固有特性。羧甲基壳聚糖与壳聚糖相比具有更好的保水性、生物相容性、粘附性、抗菌性、生物降解性和低毒性，同时羧甲基壳聚糖可以加速成纤维细胞增殖、促进创面愈合，这些优良性质使羧甲基壳聚糖更适合作为生物医用创面修复材料，具有广泛的应用前景。

硫酸软骨素(CS)是共价连接在蛋白质上形成蛋白聚糖的一类糖胺聚糖，它广泛分布于动物组织的细胞外基质和细胞表面，具有抗凝血作用。将其复合在基质表面能够增加敷料的生物相容性，利于细胞粘附增殖，加速创面愈合。

透明质酸又名玻尿酸、HA，是一种酸性粘多糖，属于高分子聚合物，是由N-乙酰葡糖胺和D-葡萄糖醛酸通过糖苷键连成的，这种多糖具有高保水性，可以起到保持细胞水分，保护细胞不受病原菌的侵害，防止感染，同时可加快皮肤组织的恢复，提高创口愈合再生能力。在基质上复合透明质酸，可提高敷料的创面修复能力，加速上皮化，调控胶原合成，有效减少瘢痕形成，使愈合后的组织更接近正常皮肤。

生物材料相对于合成材料具有生物相容性好，易于细胞附着和生长的优点，但其同时具有降解速率过快、微结构不易控制、力学强度不足的缺点。如专利CN1387923A公开了一种异种无细胞真皮支架及其制备方法，该支架系用胰蛋白酶和戊二醛处理乳猪皮而得，这种方法处理后的真皮支架具有抗张强度高、生物相容性好的有点，但其渗透性差，创面易产生积液、积气，血管化慢。专利CN1343523A公开了一种可用作创面修复的微孔异体或异种无细胞真皮替代物，采用机械或激光的方法在无细胞真皮上规则地打上密集的贯穿性的孔，这虽然可以解决无细胞真皮替代物的渗透性差的缺点，但是孔径过大或过密，会增加抗原位点的暴露和抗原提呈细胞等接触ADM的机会，导致细胞相容性差，并且会一定程度上破坏胶原支架的结构。专利CN1775189A公开了一种脱细胞真皮基质及其制备方法。该脱细胞真皮基质是将哺乳动物皮肤依次用氢氧化钠溶液和去污剂处理后得到的产品，这种方法处理后的脱细胞真皮基质具有组织相容性好、降解性好的优点，但是其抗张强度有待提高，抗菌性能不足。

发明内容

本发明目的在于克服上述现有技术的不足，提供一种具有低抗原性、优良的生物相容性、良好的力学性能和优良的抗菌性的无细胞多糖真皮基质材料的制备方法。

一种无细胞多糖真皮基质材料：在所述无细胞多糖真皮基质上复合水溶性多糖，所述水溶性多糖包括羧甲基壳聚糖、硫酸软骨素、透明质酸三种共同组成。