[发明专利]一种基于G四聚体的荧光法检测纳米银颗粒的方法有效
申请号: | 201410371127.4 | 申请日: | 2014-07-30 |
公开(公告)号: | CN104132919A | 公开(公告)日: | 2014-11-05 |
发明(设计)人: | 徐升敏;陈少鹏;吴李君 | 申请(专利权)人: | 中国科学院合肥物质科学研究院 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 安徽汇朴律师事务所 34116 | 代理人: | 汪蕙 |
地址: | 230001 安徽*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于G四聚体的荧光法检测纳米银颗粒的方法,首先利用双氧水在酸性环境中将银纳米颗粒转化成单价银离子,得到待检测的样品溶液;然后分别配置不同浓度的多种银离子溶液,作为标准品溶液以便绘制标准曲线;配置G-DNA并分别与等体积的样品溶液及标准品溶液混合,使其充分相互作用;随后加入钾离子使G-DNA折叠成G四聚体结构;最后加入N-甲基卟啉二丙酸IX(NMM),通过荧光法测定样品溶液中纳米银的含量。本发明采用荧光法对纳米银进行定量检测,具有灵敏度高、操作简单、用时短等优点;检测中采用的介质为G-DNA,具有合成简单,成本低廉,化学稳定性好等特点。 | ||
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【主权项】:
一种基于G四聚体的荧光法检测纳米银颗粒的方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)配置待检测的样品溶液:在纳米银水溶液中加入一定量的磷酸,调成酸性环境,然后加入双氧水混合均匀,将纳米银水溶液中的纳米银颗粒完全转化成银离子,得到待检测的样品溶液;(2)配置多种标准品溶液:分别配置一定范围内不同浓度的多种银离子溶液,作为标准品溶液以便绘制标准曲线;(3)取多份含G碱基重复序列的单链DNA(G‑DNA)配置G‑DNA溶液,所述G‑DNA序列为TGGGTAGGGCGGGTTGGGAAA,加热变性后,分别与等体积的样品溶液、多种标准品溶液混合并冷却至室温,得到多份混合溶液一;(4)分别在多份混合溶液一中加入KAC、Triton X‑100溶液得到多份混合溶液二,使G‑DNA折叠形成G四聚体结构;(5)在多份混合溶液二中,分别加入N‑甲基卟啉二丙酸IX(NMM)得到多份混合溶液三,使NMM与G‑DNA相互作用形成稳定的复合体;(6)通过荧光光谱仪测定多份混合溶液三的荧光光谱,根据多种标准品溶液浓度与其相对应的最大荧光吸收值绘制标准曲线,通过标准曲线即可推算样品溶液中纳米银颗粒的含量。
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