[发明专利]一种基于G四聚体的荧光法检测纳米银颗粒的方法有效

专利信息
申请号: 201410371127.4 申请日: 2014-07-30
公开(公告)号: CN104132919A 公开(公告)日: 2014-11-05
发明(设计)人: 徐升敏;陈少鹏;吴李君 申请(专利权)人: 中国科学院合肥物质科学研究院
主分类号: G01N21/64 分类号: G01N21/64
代理公司: 安徽汇朴律师事务所 34116 代理人: 汪蕙
地址: 230001 安徽*** 国省代码: 安徽;34
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摘要:
搜索关键词: 一种 基于 四聚体 荧光 检测 纳米 颗粒 方法
【权利要求书】:

1.一种基于G四聚体的荧光法检测纳米银颗粒的方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)配置待检测的样品溶液:在纳米银水溶液中加入一定量的磷酸,调成酸性环境,然后加入双氧水混合均匀,将纳米银水溶液中的纳米银颗粒完全转化成银离子,得到待检测的样品溶液;

(2)配置多种标准品溶液:分别配置一定范围内不同浓度的多种银离子溶液,作为标准品溶液以便绘制标准曲线;

(3)取多份含G碱基重复序列的单链DNA(G-DNA)配置G-DNA溶液,所述G-DNA序列为TGGGTAGGGCGGGTTGGGAAA,加热变性后,分别与等体积的样品溶液、多种标准品溶液混合并冷却至室温,得到多份混合溶液一;

(4)分别在多份混合溶液一中加入KAC、Triton X-100溶液得到多份混合溶液二,使G-DNA折叠形成G四聚体结构;

(5)在多份混合溶液二中,分别加入N-甲基卟啉二丙酸IX(NMM)得到多份混合溶液三,使NMM与G-DNA相互作用形成稳定的复合体;

(6)通过荧光光谱仪测定多份混合溶液三的荧光光谱,根据多种标准品溶液浓度与其相对应的最大荧光吸收值绘制标准曲线,通过标准曲线即可推算样品溶液中纳米银颗粒的含量。

2.如权利要求1所述的一种基于G四聚体的荧光法检测纳米银颗粒的方法,其特征在于,

所述步骤(1)中,样品溶液的体积为0.25~1mL,样品溶液中磷酸终浓度为1μM、双氧水的终浓度为2mM;

所述步骤(2)中,分别配置0.5~10μM范围内不同浓度的多种银离子溶液,作为标准品溶液;

所述步骤(3)中,配置0.25~1mL 0.2-1μM G-DNA溶液,并加入EDTA螯合去除其中存在干扰的其他二价金属离子,加热变性后,分别与等体积的样品溶液、多种标准品溶液混合并冷却至室温,得到多份混合溶液一;

所述步骤(4)中,多份混合溶液二中KAC终浓度为1mM,Triton X-100终浓度为0.05%;

所述步骤(5)中,多份混合溶液三中NMM的终浓度为1μM。

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