[发明专利]液体深层发酵高纯度灵芝菌丝粉的制备方法

摘要

本发明提供液体深层发酵高纯度灵芝菌丝粉的制备方法，其解决了现有灵芝菌丝固体发酵周期长、易染菌、最终产品品质不稳定、活性成分含量低等问题。其包括制备培养基、活化菌种、接种及培养、扩大发酵、浓缩、均质、喷雾干燥步骤。制备培养基的步骤包括：A.斜面培养基的制备；B.摇瓶培养基的制备；C.种子罐培养基的制备；D.发酵罐培养基的制备。本发明广泛用于食品工业中灵芝菌丝粉的加工中。

主权项

液体深层发酵高纯度灵芝菌丝粉的制备方法，其包括以下步骤：制备培养基、活化菌种、接种及培养、扩大发酵、浓缩、均质、喷雾干燥成粉，其特征在于，所述制备培养基的步骤包括：    A：斜面培养基的制备    按照质量百分比葡萄糖6~8%、黄豆粉15~17%、玉米粉10~12%、小麦粉10~13%、磷酸二氢钾0.1~0.3%、硫酸镁0.08~0.12%、琼脂3~5%、蛋白胨3~7%、余为红薯提取液的比例配置，PH调至7.0，分装至试管中，混匀后高温灭菌，灭菌条件：121~123℃，30~40min；灭菌结束10~15min后取出试管，摆成斜面，将斜面培养基转至28~36℃培养箱中恒温培养18~20h，无菌落长出方可取出备用；    B：摇瓶培养基的制备按照质量百分比葡萄糖6~8%、黄豆粉15~17%、玉米粉10~12%、小麦粉10~13%、磷酸二氢钾0.1~0.3%、硫酸镁0.08~0.12% 、蛋白胨3~7%、余为红薯提取液的比例配置，PH调至6.8~7.2，混匀后高温灭菌，灭菌条件：121~123℃，30~40min，冷却后放入无菌接种室待接种用；    C：种子罐培养基的制备按照质量百分比葡萄糖1~1.5%、黄豆粉3~5%、玉米粉3~5%、小麦粉2~4%、磷酸二氢钾0.1~0.3%、硫酸镁0.08~0.12% ，加水至100L，然后进行高温灭菌，灭菌条件：121~123℃，30~40min；灭菌结束后，待培养基温度降至27~35℃时，放入无菌接种室待接种用；    D:发酵罐培养基的制备 按照质量百分比葡萄糖1~1.5%、黄豆粉3~5%、玉米粉3~5%、小麦粉2~4%、磷酸二氢钾0.1~0.3%、硫酸镁0.08~0.12% ，加水至1000L，对反应罐进行加热，温度升至100~105℃时进行一次排气，继续升温至121~123℃时，关闭呼吸器进出口开关，使混合培养基在121~123℃、0.15~0.17MPa环境中灭菌30~40min，灭菌完毕，关闭加热系统使混合培养基降温至25~28℃保温待用放入无菌接种室待接种用； 所述红薯提取液的制备步骤包括：将红薯洗净去皮；放到蒸煮锅中用水煮，红薯煮至糜烂，用纱布过滤，取其滤液，即为红薯提取液； 所述活化菌种步骤包括：   （1）选用多孔菌科真菌赤芝，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：26~30℃，2~3天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种a；   （2）选根霉，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28~30℃，1~2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种b；   （3）选子囊菌科酵母菌，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28~30℃，1~2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种c；   （4）取上述母种a、b、c菌块按质量比1：2：1.5的比例接种至摇瓶培养基，26~30℃培养至菌块长成圆形后置于摇床，恒温28~30℃培养60~70h，至有菌丝球形成后即得液体培养菌种；       所述种子罐培养步骤中，将液体培养菌种按10%接种到已制备好的种子罐培养基中，在通风量为0.3～0.5(m³/m³·s)，搅拌转速为120r/min，温度为28~30℃的条件下避光培养2d，发酵后二级种子罐的种子无杂菌，培养基的菌丝体气味清香，菌丝体球多，稍粘稠；    所述发酵罐扩大培养步骤中，将种子罐培养的菌种按8%接种已制备好的发酵罐培养基中，在通风量为0.3～0.5(m³/m³·s)，搅拌转速为120r/min，温度为28~30℃的条件下避光培养6d；    所述浓缩步骤中，其使用外循环蒸发器，蒸发温度为70℃，在真空度为0.08MPa 以上的条件下，使浓缩后的溶液固形物在25%左右；    所述均质步骤中，将浓缩后的液体经压力150MPa的条件下通过均质机进行均质，使溶液中的固形物达到更加细化，更加均匀的混合；    所述喷雾干燥步骤中，在进风温度为150℃，出风温度为 80～90℃的条件下对浓缩、均质后的灵芝菌丝液进行干燥成粉，使得最终干粉的含水量少于 9% 以下，即得成品。