[发明专利]捕食线虫性真菌生物冻干制剂的制备方法有效
申请号: | 201410227501.3 | 申请日: | 2014-05-27 |
公开(公告)号: | CN104004663B | 公开(公告)日: | 2017-10-13 |
发明(设计)人: | 杨晓野;王瑞;杨莲茹;张伟 | 申请(专利权)人: | 内蒙古农业大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;A01N63/04;A01P5/00;C12R1/645 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 010018 内蒙古自治区呼和*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | 本发明属于微生物学领域,提出一种捕食线虫性真菌生物冻干制剂的制备方法,即首先将实验室分离保存的捕食线虫性真菌Duddingtonia flagrans CIM1菌株在大麦粒培养基上进行厚壁孢子批量培养,然后用冻干保护剂洗脱并保护厚壁孢子,再进行分装灭菌、预冻、真空冷冻干燥后获得。本发明成功制备了具有捕食线虫功能的捕食线虫性真菌—Duddingtonia flagrans生物冻干制剂,实验结果表明该冻干制剂既可以保持菌株活性,又可以在常温下运输和保存,且使用方便,具有很好的应用开发前景。 | ||
搜索关键词: | 捕食 线虫 真菌 生物 制剂 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种捕食线虫性真菌生物冻干制剂的制备方法,其特征在于,将捕食线虫性真菌Duddingtonia flagrans菌株在大麦粒培养基上进行厚壁孢子批量培养,然后用冻干保护剂洗脱并保护厚壁孢子,再分装灭菌、预冻、真空冷冻干燥后获得;其中,所述Duddingtonia flagrans菌株的保藏号为:CGMCC No.9201,所述冻干保护剂由体积份的蒸馏水1000份和吐温‑80 2份组成;其中,所述预冻是在‑80℃下预冻2小时,所述真空冷冻干燥的条件为:压强130×10‑3mbar~135×10‑3mbar,在‑48℃至‑55℃下,冻干18‑25h;其中,所述大麦粒培养基的制备方法为:将大麦粒清洗干净,置干燥箱中烘干,按照大麦粒质量和蒸馏水体积1:1的比例加入蒸馏水,将装有蒸馏水和大麦粒的容器于120~125℃灭菌20min后即可获得;其中,Duddingtonia flagrans菌株厚壁孢子批量培养的条件为:20~30℃温度下,每天摇动1‑3次,培养20~25天。
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