[发明专利]生血宝制剂质量检测方法及其标准指纹图谱的构建方法

摘要

本发明公开了一种生血宝制剂的指纹图谱检测方法：方法包括：(1)对照品溶液的制备；(2)供试品溶液的制备；(3)色谱条件：色谱柱为C₁₈反相色谱柱；采用梯度洗脱，流动相为乙腈与0.1～0.2％磷酸溶液组成的梯度洗脱液；检测波长为200～230nm；柱温25℃～40℃；流速0.8ml/min～1.2ml/min；分析时间60min。(4)测定：高效液相色谱法得指纹图谱。本发明的测定方法操作简便，特征性成分保留完整，重复性、稳定性良好，精密度高，专属性强。

主权项

生血宝制剂质量检测方法，其特征在于，所述方法包括：第一，溶液的制备：(1)对照品溶液的制备：用体积百分比浓度为50～100％的甲醇将芍药苷配制成每1mL含0.02～0.06mg芍药苷的对照品溶液；(2)供试品溶液的制备：取液体剂型的生血宝制剂1.0～5.0ml或固体剂型的生血宝制剂0.6～3.0g，溶于25～125mL体积百分比浓度为0～100％的甲醇或体积百分比浓度为0～50％的乙醇中，混匀，配制成供试品溶液；第二，测定及分析：高效液相色谱分析：分别精密吸取等量的对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，记录60min的色谱图，即得生血宝制剂指纹图谱；所述高效液相色谱分析中，色谱柱为C₁₈反相色谱柱；流动相A为乙腈，流动相B为质量百分比浓度为0.1～0.2％的磷酸溶液；采用梯度洗脱方式：柱温25℃～40℃；流速0.8ml/min～1.2ml/min；检测波长为200～230nm；将生血宝制剂指纹图谱与生血宝制剂标准指纹图谱相比对，鉴别生血宝制剂有效成分以及是否添加了其它成分；所述生血宝制剂标准指纹图谱按照如下步骤构建：高效液相色谱分析：分别精密吸取等量的对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，记录60min的色谱图；所述高效液相色谱分析中，色谱柱为C₁₈反相色谱柱；流动相A为乙腈，流动相B为质量百分比浓度为0.1～0.2％的磷酸溶液；采用梯度洗脱方式：柱温25℃～40℃；流速0.8ml/min～1.2ml/min；检测波长为200～230nm；对10批次生血宝制剂建立指纹图谱，通过分析比较，确定出14个共有特征峰，编号为1～14号，共有峰峰面积总和占总峰面积的90％以上，以第9号峰为参照峰，第1～14号各峰的相对保留时间分别为：0.066～0.074、0.073～0.081、0.210～0.232、0.363～0.404、0.637～0.706、0.745～0.824、0.763～0.844、0.907～1.004、1.000、1.034～1.143、1.086～1.200、1.129～1.248、1.199～1.327、1.239～1.370；以第9号峰为参照峰，第1～14号各峰的相对峰面积分别为：0.390～1.025、0.149～0.381、0.086～0.256、0.319～0.845、0.095～0.236、0.074～0.236、0.031～1.282、0.206～0.585、1.000、0.041～0.102、0.216～0.711、0.183～1.274、0.136～0.865、0.070～0.151；这些共有特征峰构成了生血宝制剂的指纹特征，作为生血宝制剂标准指纹图谱；所述的生血宝制剂由下述重量份数的原药材组成：制何首乌100，女贞子120～130，桑葚120～130，墨旱莲120～130，白芍100，黄芪100，狗脊100。