[发明专利]一种用于生物尿液中四溴双酚A分析的前处理方法

摘要

一种用于生物尿液中四溴双酚A分析的前处理方法，涉及生物样品中有机污染物的检测分析技术，可为尿液中四溴双酚A含量的测定提供前处理技术。尿液样品经pH值调节后，添加β-葡萄糖苷酸/芳基硫酸脂酶的方式对尿液进行酶解，酶解液通过ENVI-18小柱富集，富集的洗脱液用1％盐酸溶液和二氯甲烷涡旋震荡洗涤，然后用蒸馏水对回收的有机层再次洗涤。样品经超高效液相色谱-串联质谱仪检测表明方法操作简单、回收率高、除杂效果好，适用于生物尿液样品前处理，且特别适用于大批量生物尿液样品的提取净化操作。该发明可有效分解样品中四溴双酚A的共轭物并有效净化尿液样品，为尿液中四溴双酚A检测提供支持。

主权项

一种用于生物尿液样品中四溴双酚A分析的前处理方法，其特征在于：该方法包括如下步骤，(1)准确移取尿液，用稀盐酸调整尿液pH值至5.5，加入pH值为5.5的醋酸钠缓冲液；(2)加入C13标记的四溴双酚A和β‑葡萄糖苷酸/芳基硫酸脂酶，充分混合均匀；(3)置水浴恒温振荡器内恒温避光震荡酶解；(4)酶解后溶液加入少量甲醇混匀，经活化好的ENVI‑18小柱富集，用5％甲醇水淋洗，分别用二氯甲烷、甲醇洗脱，并将两次洗脱液混合均匀；(5)洗脱液加入稀盐酸溶液和二氯甲烷后涡旋震荡，置于离心机中低速离心，回收二氯甲烷层；(6)二氯甲烷层加入蒸馏水涡旋震荡洗涤，置于离心机中低速离心，保留有机层；(7)氮气吹干有机层溶剂后，用甲醇复溶，经0.2μm过滤器过滤，过滤后至超高效液相色谱‑串联质谱联用仪检测四溴双酚A浓度；另取100μL尿液，用酶法测定尿液中肌酐，用肌酐校准，避免尿液样品浓度不同对数据的影响。