[发明专利]一种通过TEAD4细胞核阳性表达情况对结直肠癌评价的方法

摘要

本发明涉及一种通过TEAD4细胞核阳性表达情况对结直肠癌评价的方法，即首先制成肿瘤组织芯片，然后进行免疫组化实验、免疫评分，根据免疫评分进行分组，最后按照TEAD4的细胞核着染情况将患者分为TEAD4细胞核阳性表达组和TEAD4细胞核阴性表达组，然后运用统计学方法分析两组病人的临床特征以及总生存期的差异。发明的一种通过结直肠癌免疫学指标TEAD4细胞核阳性表达情况对结直肠癌患者的临床特征和总体预后进行评价的方法，即根据结直肠癌患者肿瘤组织中TEAD4细胞核阳性表达的情况可以直接确定患者的临床特征和预后信息。

主权项

一种通过TEAD4细胞核阳性表达情况对结直肠癌评价的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）、制成肿瘤组织蜡块；（2）、根据HE染色确定步骤（1）所得的蜡块中肿瘤组织的位置，选取其中的肿瘤组织的中央部位制成组织芯片；（3）、对步骤（2）所得的组织芯片、阳性对照和阴性对照进行免疫组织化学染色；其中所述的阳性对照使用已证实为阳性组织的肿瘤细胞组织制成的组织芯片；所述的阴性对照使用相同的组织芯片；（4）、组织芯片常规脱蜡、水化；（5）、微波抗原修复；（6）、灭活内源性过氧化物酶；（7）、封闭非特异性蛋白；（8）、滴加一抗TEAD4一抗用5%的牛血清白蛋白水溶液按1:50稀释，至于湿盒里4℃孵育过夜；阴性对照中以PBS缓冲液代替一抗；（9）、复温45分钟；（10）、滴加二抗；（11）、DAB显色；（12）、苏木素复染；（13）、脱水和透明；（14）、封片；（15）、结果分析：阳性信号为棕黄色颗粒，用徕卡光学显微镜在200倍放大倍数下，对上述所得的每个组织位点拍摄五张图片，记录图片中TEAD4阳性染色细胞核的颜色强度；若没有棕黄色着染的细胞核，则免疫评分为0分；若阳性染色细胞核的强度为浅棕色，则免疫评分为1分；若阳性染色细胞核的强度为中度棕色，则免疫评分为2分；若阳性染色细胞核的强度为深棕色，则免疫评分为3分；（16）、根据步骤（15）所得的免疫评分进行分组，免疫评分为0、1、2的归为一组即为TEAD4细胞核阴性表达的一组，免疫评分为3的归为一组即为TEAD4细胞核阳性表达的一组；（17）、利用Spss11.0分析软件和Graph Pad prism 5作图软件，按照步骤（16）的分组对TEAD4细胞核阳性和阴性表达情况与患者的临床特征和总生存率的关系进行分析，来判定TEAD4的细胞核表达情况与结直肠癌患者的预后效果。