[发明专利]一种小口径原位组织工程血管及构建方法

摘要

本发明公开了一种小口径原位组织工程血管及构建方法，方法为：(1)将吡啶、对硝基苯基氯甲酸酯加入聚己内酯二氯甲烷溶液中，反应，沉淀，干燥；(2)将聚乙二醇二胺二氯甲烷溶液加入到步骤(1)获得的沉淀物二氯甲烷溶液中，反应，沉淀，干燥后得到聚己内酯聚乙二醇二胺嵌段共聚物；(3)采用静电纺丝技术，以聚己内酯聚乙二醇二胺嵌段共聚物与聚三亚基碳酸酯的混合溶液，制备管型支架材料；(4)将管型支架材料浸入含EDC/NHS的肝素溶液，进行肝素化修饰，得到一种小口径原位组织工程血管。本发明的原位组织工程血管，具有与天然脉管相似的力学性能及良好的血液相容性；在体内逐步降解的同时允许自体细胞的长入；成品易于保存。

主权项

一种小口径原位组织工程血管的构建方法，包括如下步骤：(1)在0～4℃，搅拌条件下，将吡啶、对硝基苯基氯甲酸酯加入质量体积浓度为8％～10％的聚己内酯二氯甲烷溶液中，室温下反应2～4h，反应混合物放入0～4℃乙醚中沉淀，沉淀物真空干燥；所述吡啶、对硝基苯基氯甲酸酯、聚己内酯的质量比为1∶1～1.5∶3000，所述聚己内酯的分子量为40,000～100,000；(2)以二氯甲烷为溶剂，分别配制质量体积浓度为50％～70％的聚乙二醇二胺溶液和质量体积浓度为6％～8％的步骤(1)获得的沉淀物溶液，在搅拌条件下，按体积比为1∶20～30的比例，将聚乙二醇二胺溶液一滴滴地加入到沉淀物溶液中，室温下反应12～24h，将反应混合物加入到0～4℃的乙醇中沉淀，真空干燥后得到聚己内酯‑聚乙二醇二胺嵌段共聚物；所述聚乙二醇二胺的分子量为2000～6000；(3)将外径为2～6mm的不锈钢管安装至静电纺丝旋转接收装置上，然后以体积比为3∶1的二氯甲烷、N‑二甲基甲酚胺的混合溶液为溶剂，以质量比为1～3∶1～3聚己内酯‑聚乙二醇二胺嵌段共聚物与聚三亚基碳酸酯的混合物为溶质，配制成质量体积浓度为8％～10％的混合溶液，搅拌均匀，采用静电纺丝技术制备管型支架材料；(4)以0.05mol/L，pH＝5.6的脂肪醇聚氧乙烯醚磺基琥珀酸酯二钠盐缓冲液为溶剂，配制质量体积浓度为0.4％～0.6％的肝素溶液；在肝素溶液中加入EDC和NHS，37℃下，活化肝素的羟基团10min，浸入管型支架材料，于室温，60～80r/min搅拌条件下反应2～6h；用0.01mol/L PBS溶液浸泡肝素化的管型支架材料2～4h，其间换所述PBS溶液3‑6次，再用蒸馏水浸泡2～4h，其间换蒸馏水3‑6次；真空干燥，消毒灭菌后得到一种小口径原位组织工程血管，所述EDC与肝素的质量比为1∶1～2，EDC与NHS质量比为1～2∶1，所述EDC为1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨丙基)‑碳化二亚胺的缩写，NHS为N‑羟基琥珀酰亚胺的缩写。